毛蕊花苷的体内代谢及其降血尿酸水平的分子机制研究

血中尿酸过多和自由基的存在易引发包括痛风在内的多种疾病。通过科学饮食调控血中尿酸水平一直是国内外研究热点。苯乙醇苷类物质来源广泛、功能多样，长久吸引着药物研发人员和保健食品研究人员的眼光。本课题组前期实验表明毛蕊花苷降尿酸水平与其抑制黄嘌呤氧化酶活性存在相关性。本项目为研究毛蕊花苷抑制黄嘌呤氧化酶活性的机理，采用HPLC-MSn技术鉴定灌胃给药的毛蕊花苷在大鼠各组织内的代谢产物化学结构，通过HPLC对代谢产物定量以分析毛蕊花苷的体内代谢过程，并基于黄嘌呤氧化酶结构中的催化活性位点在分子水平上探讨毛蕊花苷及其代谢产物抑制黄嘌呤氧化酶活性的机理，为服用功能食品预防高尿酸血症提供理论基础。本项目的研究成果亦可为其它苯乙醇苷类物质的体内代谢过程和降尿酸功能研究做出贡献。

通过科学饮食调控血中尿酸水平一直是国内外研究热点。毛蕊花苷是植物性资源的重要成分。本项目分析了毛蕊花苷的体内过程，鉴定了毛蕊花苷经体外模拟消化和体内灌胃给药后的代谢产物化学结构，推测其体内代谢反应，并在分子水平上探讨了毛蕊花苷及其代谢产物体内外抑制黄嘌呤氧化酶活性的机理。本项目的研究成果为服用保健食品来源预防高尿酸血症提供了理论基础,亦可为其它物质和日常食品成分的体内代谢过程和降尿酸功能研究提供借鉴。.1、通过响应面分析法得到从车前子中提取苯乙醇苷的乙醇回流提取和超声提取的最佳工艺条件。优化了利用大孔吸附树脂对车前子提取液的纯化工艺参数，从车前子原料可获得含量80%的精制物，得率0.61%。.2、对氧嗪酸钾致高尿酸血症模型SD大鼠灌胃毛蕊花苷，其肝脏黄嘌呤氧化酶活性有明显抑制作用，血尿酸水平下降明显，尿素氮和肌酐两个指标与正常组无明显差异。说明给药毛蕊花苷对大鼠高尿酸血症有防治作用，且对大鼠的肾、肝等组织未产生损伤。.3、采用紫外分光光度法测定毛蕊花苷的浓度，结合摇瓶法，正辛醇-水系统测定毛蕊花糖苷的油水分配系数为0.273，log P=0.566 (n=3)，表明毛蕊花糖苷易溶于水。.4、灌胃给予定量的毛蕊花苷，检测到毛蕊花苷在30min内即可达到血液峰值，15-120 min大鼠体内各组织的毛蕊花苷含量以胃和小肠中最高，而心、肝、脾、肺、肾和血浆含量很低。因此毛蕊花苷的消化吸收率较低。.5、采用HPLC及LC-MS技术对毛蕊花苷体外模拟消化产物进行了研究，结果表明有少部分毛蕊花糖苷在人工消化液的作用下发生酯键及糖苷键的断裂，大部分仍保持毛蕊花糖苷原型。通过UPLC-QTof-MS2从尿液中鉴定出毛蕊花糖苷的数个代谢产物，可以看出毛蕊花糖苷在体内主要发生了‖相代谢反应包括甲基化、硫酸化、葡萄糖醛酸化等。.6、通过紫外分光光度仪、高效液相色谱仪、圆二色谱仪、荧光色谱仪等手段扫描毛蕊花苷和黄嘌呤氧化酶的孵育体系中相关光谱行为，发现游离毛蕊花苷的量随着孵育时间的增加而减少，酶蛋白结构和行为发生变化，表明毛蕊花苷和黄嘌呤氧化酶发生了分子间结合。.7、体内外试验结果表明其主要代谢产物具有一定的降血尿酸和抑制黄嘌呤氧化酶活性作用。.8、研究了85种日常果蔬、谷物杂粮的醇提物对黄嘌呤氧化酶活性的抑制作用，发现部分常见果蔬还可体内抑制黄嘌呤氧化酶，降低模型小鼠血尿酸水平。