HBV3'末端缺失的preS/S基因片段基因小鼠的构建及研究

在分析HBVadr亚型基因组DNA的基础上，克隆的3’末端缺失的PreS/S基因片段，并构建了真核表达载体，通过体外培养细胞的转化实验证实其表达特性。进而，采用显微注射途径将其注受精卵，以制备转基因小鼠。结果得到了16只小鼠，其中7只存活，9只在出生后不久死亡。通过对存活小鼠血清的特异性抗原的ELISA检测发现，在7只存活的小鼠中有2只可以较高水平地表达3’末端而缺失的PreS/S，进而分析了转基因在这2只阳性小鼠中整合情况，并进行了保种，现已传至第三代。近1年追踪观察和分析发现，这2只建立者血清中PreS/S的表达水平呈下降低趋，以至不能检测。子一代和子二代血清中也未检测出PreS/S产物的存在。推测转基因的甲基化可能是影响表达的主要因素。此现象的解决正在进行之中。