棕色脂肪分泌特异性脂肪因子在改善非酒精性脂肪性肝病脂肪沉积中的作用及机制研究

Energy imbalance is a key risk factor for the progression of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD).Activation of brown fat may improve energy imbalance, which is a promising new treatment strategy, but the mechanism has not been clarified. Our previous studies showed that brown fat transplantation/activation could decrease adiponectin levels and improve lipid deposition in obese mice. Accordingly, we hypothesize brown fat transplantation or activation regulates the expression or secretion levels of adipokines, which furtherreduces the lipid deposition of hepatocytes and improves the energy imbalance. We will identify NAFLD-associated specific secretion fatty factor of brown fatby using the secretory protein identification system and serum specimens screening from NAFLD patients. We will also analyzethe cytokine levels and hepatic lipid deposition with the obese mice brown fat transplantation or low temperature treatment model. We will further analyze mitochondria number, UCP1, Cidea protein expression level and cell oxygen consumption by using mice brown fat primary cells and C3H10T1/2 cells. We will further analyzethe regulation of adipokines on lipid metabolism, Sit1,PGC-1 alpha and SREBP1c protein withthe fatty liver cell model in vitro. Our study will clarify a novel mechanism of lipid metabolism in brown adipose tissue and provide a new molecular therapeutic basis for NAFLD.

能量失衡促使非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）进展，激活棕色脂肪可改善能量失衡，是有前景的治疗新策略，但详细机制尚未完全阐明。我们前期研究表明：棕色脂肪移植/激活可下调肥胖小鼠脂联素水平并改善肝脂质沉积。据此提出假说：棕色脂肪移植或激活通过调控脂肪因子水平或分泌减少肝细胞脂质沉积、改善能量失衡。本项目拟通过分泌蛋白鉴定体系和患者血清标本筛选棕色脂肪分泌的NAFLD相关特异性脂肪因子；利用肥胖小鼠棕色脂肪移植或低温处理模型，分析棕色脂肪移植或激活后脂肪因子水平与肝脂质沉积的关系；利用小鼠棕色脂肪原代细胞和C3H10T1/2细胞，观察脂肪因子对细胞线粒体数量，UCP1、Cidea蛋白表达等细胞分化指标和耗氧量等的影响；利用体外脂肪肝细胞模型，观察脂肪因子对Sit1、PGC-1α、SREBP1c等脂质代谢关键功能蛋白的调控作用。通过研究阐明棕色脂肪调控脂质代谢新机制，为NAFLD治疗研究提供新依据

目的 非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）包括从单纯性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver，NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）、肝纤维化/肝硬化和肝细胞癌等慢性肝病。NAFLD已经成为了世界范围内的主要的慢性肝病类型。然而，NALFD的发病机制仍不清楚。本项目希望能够确定影响NAFLD发生发展的关键因素，并探索它们在NAFLD进展中的作用和机制。 .方法 筛选基因表达综合数据库中与非酒精性脂肪性肝病进展相关的差异表达基因；在多种肝损伤模型中研究了新发现的膜蛋白簇分化146 (CD146)与NALFD发病机制之间的联系；通过腺相关病毒诱导的肝特异性CD146过表达小鼠，研究并确定了CD146如何调节非酒精性脂肪性肝病进展的机制。 .结果CD146被鉴定为与非酒精性脂肪性肝病发展相关的一种新的重要蛋白。CD146表达升高与非酒精性脂肪肝的加重相一致。在肝脏特异性CD146过表达小鼠模型中，CD146的上调诱导了肝脏炎症的发生，并导致从NAFL到NASH的肝损伤加重。CD146通过增强肝细胞-免疫细胞相互作用发挥其作用，导致库普弗细胞的积累。此外，筛选和鉴定结果表明，可溶性CD 146可能是一种新的脂肪因子，可溶性CD 146和膜CD146可能在非酒精性脂肪性肝病的发病中起到重要作用。然而，可溶性CD 146的功能和详细机制需要进一步研究和解释。 .结论CD146升高通过增强肝细胞与免疫细胞的相互作用促进非酒精性脂肪性肝病的发展。抑制CD146可能是治疗非酒精性脂肪性肝病的潜在治疗策略。