“异经同治”穴位功能主治特点的MAPK信号转导机制研究

摘要：前期研究发现：电针绝经后骨质疏松患者命门穴和关元穴后，两组患者血清中骨代谢相关激素水平均提高，生存质量明显改善。究其原因是由于命门穴和关元穴同属于相同或相近的神经节段，具有"异经同治"功能主治特点。本课题以绝经后骨质疏松症为切入点进行研究。MAPK通路影响OB和OC的增殖、分化和凋亡，最终导致骨质疏松。本研究在前期工作基础上，分组电针去卵巢骨质疏松模型大鼠命门穴和关元穴，用Western免疫印迹法检测各组大鼠下丘脑MAPK上游激酶MEK1/2表达，免疫组化法检测各组大鼠细胞外信号转导激酶（ERK1/2）表达,揭示电针治疗去卵巢骨质疏松模型大鼠下丘脑MAPK信号转导机制，为"异经同治"穴位功能主治特点应用于临床取穴提供科学的依据。

课题前期研究表明：电针绝经后骨质疏松患者命门穴和关元穴后，两组患者血清骨代谢相关激素水平均提高，生存质量明显改善。本项目利用去卵巢骨质疏松症大鼠模型开展实验研究，揭示“异经同治”穴位功能主治特点的MAPK信号转导机制。（1）放免法检测大鼠血清雌二醇( E2)水平，荧光定量PCR(探针法)检测各组大鼠肾上腺ERαmRNA基因表达。发现去卵巢后，大鼠肾上腺可起代偿作用，电针同神经节段“命门”穴、“关元”穴，均能提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素水平，并影响大鼠ERα在肾上腺的表达，两组无差异。（已撰写论文，待发表）；（2）免疫组化法检测大鼠股骨骨形成蛋白-2（BMP－2）信号转导蛋白表达，ELISA法检测大鼠血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平，运用三点弯曲试验检测大鼠股骨骨生物力学的变化。结果表明：①电针“命门”穴能增加股骨BMP-2的表达，提高骨生物力学性能，增强骨强度，治疗绝经后骨质疏松症。②电针关元穴可提高大鼠血清IGF-1水平和骨强度，对绝经后骨质疏松症治疗有防治作用；（3）用Western-blot法检测各组大鼠下丘脑Raf、丝裂原激活蛋白激酶激酶（MEK1/2）、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）表达，结果表明：电针关元组、电针命门组p-ERK1／2蛋白水平明显高于模型组，关元组、命门组比较无差异；（4）探寻神阙穴定位（论文已发表）；（5）对大鼠命门穴的取穴方法及针刺注意事项进行总结，论文已发表。（6）对针刺实验研究中大鼠非经非穴选取方法进行探讨，论文已发表。(7)本项目共培养硕士研究生5名。