钙离子对大鼠肾髓袢升支粗段管周膜钾通道活性调控机制的研究

肾脏髓袢升支粗段对NaCl的主动重吸收是髓质渗透梯度建立的直接动力，在尿液的浓缩和稀释方面发挥着重要作用。髓袢升支粗段上皮细胞的钾通道在该段肾小管对NaCl的主动重吸收中扮演重要角色。细胞外液中的钙离子同局部代谢产物腺苷、花生四烯酸及前列腺素E2等物质一样，可能通过对管周膜上钾通道的影响，调控NKCC2同向转运体的活性，使髓袢升支粗段NaCl的重吸收发生改变，进而影响尿量。本研究利用膜片钳技术和分子生物学手段，研究高、低浓度钙对肾脏髓袢升支粗段管周膜钾离子通道活性的影响，探讨钙对钾通道活性调节的信号转导通路，论证"高、低两种浓度钙对钾通道活性的各自调节，可能是高、低浓度钙对髓袢升支粗段Na+和Cl-的转运具有不同作用的重要原因"的假设。本项目将近一步揭示肾髓袢升支粗段管周膜钾离子通道的调控机制，深入地阐明髓袢升支粗段对NaCl的重吸收机理，并对高血压发病机制的探讨提供新的研究途径。

本课题<钙离子对大鼠肾髓袢升支粗段管周膜钾通道活性调控机制的研究>的研究，是利用膜片钳技术和分子生物学技术，通过探讨细胞外钙离子对肾脏髓袢升支粗段管周膜钾离子通道的影响，揭示肾脏髓袢升支粗段管周膜钾离子通道的调控机制。按照计划书的实验安排，完成了预设的的实验内容。 .一、高浓度钙离子对肾髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性的影响：.1．研究Ca2+对大鼠肾脏髓袢升支粗段管周膜钾通道的作用.2. 研究cAMP-PKA途径、PLA2-AA信号途径、PLC-PKC信号途径在Ca2+浓度升高对髓袢升支粗段管周膜钾通道活性调节中的作用.3.观察50μmol/L的钙敏感受体激活剂Neomycin对髓袢升支粗段管周膜钾通道活性的影响.二、低浓度钙离子对肾髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性的作用：.1. CaSR在低浓度钙离子对大鼠肾脏髓袢升支粗段50pS钾通道影响中的作用。.2.PLA2-AA信号转导途径在低浓度Ca2+对髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性调节中的作用.3.cAMP-PKA信号转导途径在低浓度Ca2+对髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性调节中的作用.4. PLC-PKC信号转导途径在低浓度Ca2+对髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性调节中的作用.研究证实：.一、在大鼠肾脏髓袢升支粗段管周膜主要存在三种钾通道：50-pS、70-pS和100-pS钾通道，其中 50-pS出现的频率最高。.二、细胞外Ca2+升高显著抑制大鼠肾脏髓袢升支粗段50-pS钾通道的活性，Ca2+对50-pS钾通道的调节作用有剂量依赖性。.三、PLC-PKC信号转导途径介导了细胞外Ca2+升高对大鼠肾脏髓袢升支粗段50-pS钾通道的抑制作用。.四、Ca2+升高对大鼠肾脏髓袢升支粗段50-pS钾通道的抑制作用可能是通过Ca2+激活细胞膜上的CaSR实现的。.五、低浓度Ca2+能激活大鼠肾脏髓袢升支粗段管周膜50pS。.六、低浓度Ca2+对大鼠肾脏髓袢升支粗段的50pS钾通道的激活作用是通过抑制CaSR实现的。.七、 低浓度Ca2+钙离子对50pS钾通道是通过PLA2-AA途径来实现的。PLC-PKC信号转导途径介导了低钙对髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道的抑制作用..本课题组研究期间发表SCI研究论文4篇。