提取电针有效鼠和无效鼠中脑导水管周围灰质RNA为模板进行DDRT-PCR,用银染方法显示差异条带,回收差异条带并进行二次PCR获得19条差异条带,其中9条来自电针有效鼠,10条来自电针无效鼠。将其中18条差异条带分别克隆至PCR21TA载体,转染DH5α细胞,提取重组质粒。用EcoRI酶切鉴定插入片段为正确的克隆,并用Northern点杂交方法从18个克隆中筛选出3个阳性克隆分别是H1、H4和L3。将这3个片段进行测序分析发现H1为177bp、H4为225bp、L3为336bp。用BLAST方式与基因序列数据库进行同源比较,发现与现有基因无明显同源性,均为新的基因,已登录在Genbank,登录号分别是AF141361(H1)、AF141360(H4)、AF141362、(L3)。
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数据更新时间:2023-05-31
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