农杆菌T－复合物招募蛋白生物化学功能和特性的研究

农杆菌T－复合物招募蛋白是最近鉴定出来的一类参与T－DNA转运的新蛋白，该招募蛋白可使待转运的T－DNA复合物聚集到四型分泌系统附近，而影响T－DNA转运。尽管招募蛋白的生物学功能已经明确，但对其生化功能却一无所知。农杆菌的招募蛋白是一类高度保守的蛋白，很多微生物都有其同源蛋白，但均是假设蛋白，因此对农杆菌招募蛋白的生化功能开展研究具有广泛的普遍意义。据预测，招募蛋白含有一个结合核苷的结构域和一个核苷转移酶结构域。本研究将鉴定招募蛋白是否具有所预测的生化功能。首先将以招募蛋白的融合蛋白去结合各种核苷酸，确定招募蛋白能结合哪种核苷酸。当可被招募蛋白结合的核苷酸确定后，将对有关核苷酸进行同位素标记，看招募蛋白能把核苷转到什么物质上，以确定招募蛋白所催化的反应，然后研究其催化特性，通过点突变，确定其活性部位的氨基酸，研究其生化特性与生物学功能的关系，特别是招募蛋白的生化特性如何影响其招募功能。