双歧杆菌果糖新型ABC转运机制的研究

双歧杆菌果糖的转运机制可以揭示其在肠道中的适应性。我们利用蛋白质组学、转录组学和生物信息学分析得到受果糖诱导的果糖转运相关蛋白（BL0033、 BL0034、BL0035和BL0036）；采用基因敲除构建转运蛋白缺失突变体和回复突变体，进行不同糖发酵的比较蛋白质组研究和突变体特性的研究，确定和验证它们的基因功能；采用透析平衡试验它们与底物结合的特异性，筛选果糖转运中特异性的透性酶，最终得到果糖ABC转运系统的三个酶：BL0033、BL0034和BL0035或BL0036。然后采用GST沉降实验、免疫共沉淀实验（IP）等进行蛋白质-蛋白质相互作用的体内体外实验，研究果糖ABC转运系统蛋白两两是否存在特异性相互作用；进一步确定果糖转运蛋白两两间相互作用的功能结构域，和转运蛋白的磷酸化作用及作用位点。从而揭示双歧杆菌果糖转运的分子机制，建立双歧杆菌果糖转运的分子模型。