基于“虚瘀致瘤”学说研究肺癌发病机制及大黄蛰虫丸作用机理

With the increase in lung cancer mortality，The incidence of passive smoking and lung cancer in nonsmokers is the focus on。Research in the previous stage of Clinical observation of lung cancer syndromes and in vitro study of Dahuang Zhechong Pill inhibits the expression of lung adenocarcinoma gene,Based on the deficiency stagnation induced tumor theory, On the basis of small dose of tumor cell inoculation，increasing factors of exogenous evil，stagnation and deficiency, To investigate the pathogenic factors of mice lung cancer as well as external evil influence on the pathogenesis of lung cancer xenografts in mice and the survival, Using gene chip for protein expression differences, According to Chinese medicine, "xie zhi suo cou qi qi bi xu", "cancer, rock", caused by blood stasis theory, Selection of Dahuang Zhechong Pill tonic and removing blood stasis as intervention, using chemotherapy drugs "shun pa" as control, Study on the intervention effect of Dahuang Zhechong Pill. In order to study the risk factors of lung disease, blood stasis and deficiency in the molecularand gene level of the reaction; Effect of Dahuang Zhechong Pill on the possible pathway of tumor, For the providing of treatment in prevention of lung cancer and the "due to gene".

随着肺癌死亡率的提高，非吸烟人群被动吸烟促使肺癌发病是目前研究的焦点之一。课题在对肺癌证型的临床观察、体外大黄蛰虫丸抑制肺腺癌基因表达的基础上，基于"虚瘀致瘤"学说，利用人工气候箱模拟寒热环境、染毒箱制备小鼠被动吸烟，在小剂量肿瘤细胞接种的基础上，增加外邪（寒热刺激、被动吸烟）、致瘀、致虚因素，进行不同诱因诱发小鼠肺癌，探讨肺癌的发病机制及生存状况。利用蛋白芯片查找蛋白差异表达，并根据中医"邪之所凑，其气必虚"、"癌者，岩也"，为瘀结所致的理论，选用补虚祛瘀的大黄蛰虫丸作为干预，以化疗药物"顺帕"作为对照，探讨经方大黄蛰虫丸的干预作用。以期研究肺癌病的发病因素及肺癌证"虚、瘀"本质在分子、基因层面上的反应；进而研究大黄蛰虫丸在体内抑制肿瘤可能的作用途径或作用环节，为预防肺癌和审"因"论治提供依据。

本课题组在前期对肺癌证型的临床观察、体外大黄蛰虫丸抑制肺腺癌基因表达的基础上, 基于"虚瘀致瘤"学说，利用寒热刺激、饥饿加复合刺激、冷水游泳寒冷刺激、声光复合刺激等致瘀，探讨被动吸烟对Lewis肺癌荷瘤小鼠的影响，以及经方大黄蛰虫丸对Lewis肺癌荷瘤小鼠被动吸烟影响下的免疫状态和治疗效果的干预作用。. 研究内容为寒热交替刺激对正常及免疫低下大鼠肺功能的影响,寒冷刺激建立寒凝血瘀证动物模型的研究,饥饿加复合刺激建立血瘀动物模型的研究,及大黄蛰虫丸对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫机制影响的实验研究。. 结果显示寒热交替刺激对大鼠的一般情况均有影响，尤其对于本身免疫力低下的大鼠影响更为明显。采用冷水游泳寒冷刺激可成功建立寒凝血瘀证模型。饥饿状态下施加复合刺激而致情志失调的方法，成功建立了气滞血瘀证小鼠动物实验模型。大黄蛰虫丸对Lewis肺癌荷瘤小鼠被动吸烟条件下的一般情况、体重、脏器指数、形态学改变及免疫指标CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞均有明显改善及免疫调节作用（P＜0.05或P＜0.01），与顺铂组比较，无明显差异。其中一般情况、体重、脏器指数变化优于顺铂组（P＜0.05）。Foxp3基因表达： 2周后，与空白组比较，造模小鼠的脾组织Foxp3基因表达均增强，被动吸烟组最明显，有非常显著性差异（P＜0.01）；与被动吸烟组比较，大黄蛰虫丸组、顺铂组脾组织Foxp3基因表达均下降，并均有非常显著性差异（P＜0.01）；大黄蛰虫丸组与顺铂组相比，顺铂组脾组织Foxp3基因表达下降，有显著性差异（P＜0.05）。4周后，与空白组比较，模型组、大黄蛰虫丸组与顺铂组小鼠Foxp3基因表达水平均增强，模型组有非常显著性差异（P＜0.01），被动吸烟组小鼠Foxp3基因表达水平下降，有显著性差异（P＜0.05）；与模型组比较，被动吸烟组、大黄蛰虫丸组与顺铂组均下降，被动吸烟组、顺铂组均有非常显著性差异（P＜0.01），大黄蛰虫丸组无差异（P＞0.05）；与被动吸烟组比较，大黄蛰虫丸组与顺铂组小鼠均增强，均有显著性差异（P＜0.05）；大黄蛰虫丸组与顺铂组小鼠Foxp3基因表达水平无显著性差异。本研究成功建立了实验动物模型并通过大黄蛰虫丸对被动吸烟干预下的Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫机制的研究，对于肺癌的预防、提高中晚期肺癌患者的生存质量有重要的社会意义。