抗PSMA适配子介导的细胞自噬和凋亡对前列腺癌的靶向杀伤作用研究

复发、转移及晚期前列腺癌目前尚无较理想的治疗方案。促进细胞自噬和凋亡已成为肿瘤治疗的新策略，但存在效应分子的表达靶向性差及转运效率低等缺点。本研究基于肿瘤细胞自噬作用缺失、抗凋亡能力增强的特点，以及源于核孤儿受体Nur77的短肽NuBCP-9能通过构象变化使肿瘤细胞中高表达的Bcl-2从抗凋亡转变为促凋亡这一重大发现，拟探索抗PSMA适配子(aptamer)介导的细胞自噬和促凋亡分子在前列腺癌治疗中的应用：构建抗PSMA适配子介导的自噬分子beclin1和凋亡转换分子NuBCP-9靶向系统，观察其在体内外对前列腺癌细胞的杀伤作用，实现既利用前列腺癌特异性抗PSMA适配子介导beclin1上调其在肿瘤细胞的表达以增强肿瘤细胞的自噬作用；同时通过NuBCP-9的转换作用促使bcl-2发挥促凋亡作用，从而特异性地同步促进前列腺癌细胞的自噬和凋亡，最终形成对前列腺癌"一箭双雕"的靶向多重杀伤效应。

复发、转移及晚期前列腺癌目前尚无较理想的治疗方案。促进细胞自噬和凋亡已成为肿瘤治疗的新策略，但存在效应分子的表达靶向性差及转运效率低等缺点。本研究基于肿瘤细胞自噬作用缺失、抗凋亡能力增强的特点，以及源于核孤儿受体Nur77的短肽NuBCP-9能通过构象变化使肿瘤细胞中高表达的Bcl-2从抗凋亡转变为促凋亡这一重大发现，探索了抗PSMA适配子(aptamer)介导的细胞自噬和促凋亡分子在前列腺癌治疗中的应用。首先，检测了前列腺癌细胞PC3、PC3M、LNCaP、DU145、22RV1等细胞及前列腺癌组织中Beclin-1蛋白的表达情况，发现Beclin-1在肿瘤细胞及组织中的表达均下调；其次，分析了Beclin-1启动子区域GpC甲基化情况，发现beclin-1启动子区存在甲基化；原核表达了链霉亲和素Streptavidin与Beclin-1融合蛋白，明确了抗PSMA适配子的前列腺癌细胞靶向性；最后，借助链霉亲和素-生物素构建了PSMA适配子靶向的细胞自噬和促凋亡偶联物系统，检测了该系统对前列腺癌细胞的杀伤作用，发现这一系统能够靶向诱导前列腺癌细胞凋亡，并增强细胞自噬作用。上述结果实现了既利用前列腺癌特异性抗PSMA适配子介导beclin1上调其在肿瘤细胞的表达以增强肿瘤细胞的自噬作用，同时又通过NuBCP-9的转换作用促使bcl-2发挥促凋亡作用，从而特异性地同步促进前列腺癌细胞的自噬和凋亡的目的，有望开辟对前列腺癌靶向治疗的新思路。该项目发表研究论著5篇，培养硕士研究生2名，青年学术带头人1名，获省级科学技术一等奖2项。