4-HPR调节E-钙粘素对尿路上皮癌细胞侵袭与转移的影响

N-4-羟苯维甲酰胺(4-HPR)是人工合成的类维生素A类似物之一。在动物实验和临床实验中均显示出对尿路上皮癌的化学预防和生长抑制能力。4-HPR广泛参与并调节尿路上皮癌细胞的生长、分化和凋亡过程。我们初次发现，4-HPR在mRNA和蛋白水平上都能明显上调尿路上皮癌细胞 E-钙粘素(E-Cad)基因的表达，而且与功能连接分子β连环素的结合也更紧密，提示药物可能对膀胱癌细胞的侵袭和转移有抑制作用。本课题以两种尿路上皮癌细胞系为4-HPR的作用对象，建立共转染E-Cad siRNA表达载体和绿色荧光蛋白GFP表达载体的膀胱癌细胞系，并获得稳定转染的细胞株。通过体外肿瘤细胞浸润试验结合膀胱癌移植瘤动物模型，探讨4-HPR对膀胱癌细胞侵袭和转移的影响以及E-Cad基因在其中的作用，为4-HPR的临床应用以及筛选类似类维生素A类似物治疗尿路上皮癌提供理论依据

N-4-羟苯维甲酰胺(4HPR)是人工合成的类维生素A 类似物之一，在动物实验和临床实验中均显示出对尿路上皮癌的化学预防和生长抑制能力。前期研究发现4-HPR 在mRNA 和蛋白水平上都能明显上调尿路上皮癌细胞 E-钙粘素(E-Cad)基因的表达，而且与功能连接分子β连环素的结合也更紧密，提示药物可能对膀胱癌细胞的侵袭.和转移有抑制作用。本课题以三种尿路上皮癌细胞系为4-HPR 的作用对象，研究4HPR对膀胱尿路上皮癌细胞 E-钙粘素和β连环素表达的影响和细胞增殖、周期、凋亡以及侵袭能力的影响，为4HPR治疗尿路上皮癌提供理论依据。结果显示：4HPR促进膀胱尿路上皮癌细胞细胞内游离β连环素的降解，抑制其核内移位，降低β连环素参与的WNT通路下游蛋白MMP2、MMP7、MMP9和CyclinD1水平，在不引起明显的细胞凋亡和细胞周期改变的情况下显著抑制膀胱尿路上皮癌细胞的增殖、迁移和侵袭功能，其机制可能与4HPR抑制Akt/GSK3β途径磷酸化，促进GSK3β降解β连环素有关。3种膀胱癌细胞4HPR处理后E钙粘素蛋白表达水平变化不一致，有待进一步研究。通过基因表达谱芯片和miRNA芯片寻找参与4HPR对Akt/GSK3β/β连环素/WNT途径调节的分子靶标和机制，已验证Wnt5a和FGFR4有显著变化，正在进行进一步的研究，其他靶标有待下一步研究。体外实验由于几次膀胱癌细胞株在裸鼠皮下种植成瘤率较低，且肿瘤大小不均一，未能如期完成。