肢体缺血预处理脑保护作用及上调p38 MAPK和ERK的神经体液机制

我们最近的研究证实，肢体缺血预处理可通过上调海马CA1区p38 MAPK和ERK的表达，诱导大鼠的脑缺血耐受。然而，遭受缺血打击的大脑与预处理的肢体间相隔较远，保护性信号如何从下肢传递到大脑，并通过上调海马p38 MAPK和ERK的表达发挥脑保护作用，其中的机制尚不完全清楚。鉴于神经、体液机制在机体内参与信号传导的广泛性，本课题拟在我们上述工作的基础上，采用大鼠四血管闭塞全脑缺血模型，应用免疫组织化学、硫堇染色、TUNEL染色、western blot、ELISA、生化试剂盒测定等技术，观察抑制神经通路、体液通路或神经-体液通路是否影响肢体缺血预处理的脑保护作用；同时观察抑制上述通路后，对肢体缺血预处理上调的大鼠海马CA1区p38 MAPK和ERK表达的影响。通过上述研究，探讨神经体液机制在肢体缺血预处理诱导的脑缺血耐受及上调海马CA1区p38 MAPK和ERK表达中的作用。

我们既往的研究证实，肢体缺血预处理（LIP）可通过上调海马CA1区p38 MAPK和ERK的表达，诱导大鼠的脑缺血耐受。本课题进一步研究了肢体缺血预处理脑保护作用及上调p38 MAPK和ERK的神经体液机制。应用硫堇染色、TUNUL染色、免疫组化、Western blot、ELISA、生化试剂盒测定等技术进行了研究，结果如下：①切断双侧股神经和∕或坐骨神经，可部分阻断LIP抑制脑缺血大鼠海马CA1区神经元迟发性死亡和凋亡的作用；②切断双侧股神经和∕或坐骨神经，可部分阻断LIP上调的大鼠海马CA1区p38 MAPK和ERK蛋白的表达；③自由基清除剂DMTU或腺苷A1受体拮抗剂DPCPX可部分阻断LIP抗神经元迟发性死亡和凋亡的作用，腺苷可通过抑制神经元凋亡诱导脑缺血耐受；④自由基清除剂DMTU或腺苷A1受体拮抗剂DPCPX能部分阻断LIP上调的海马CA1区p38 MAPK和ERK蛋白的表达，腺苷能上调海马CA1区p38 MAPK和ERK蛋白的表达。这些结果表明，神经体液机制参与了LIP脑保护作用及上调p38 MAPK和ERK的表达。