新型异源抗原决定簇纤毛载体的构建及其应用研究

本研究的目的是探讨CS3菌毛作为导源抗原表位表达载体的可能性。在计算机对CS3亚基结构模拟分析的基础上，预测在CS3第82和83位残基之间插入一个异源抗原表位后，对CS3基因的表达和纤毛的装配影响不大。应用PCR定点突变和基因重组技术，在编码第82和83位残基的DNA序列之间引入一个限制性酶切位点SacⅡ，构建成可插入外源序列的表达载体pMGD15。在此位点分别插入霍乱毒素B亚其CTP3抗原决定簇（15aa）、口蹄疫病毒的一个VP1（9aa）的抗原表位和HBV的preS2的（120aa-145aa）抗原决定簇，全细胞ELISA、SDS-PAGE、电镜和免疫电镜证明CS3能与异源抗原表位以杂合蛋白的形式表达并能在重组菌表面形成杂合纤毛。证明CS3可以作为导源抗原表位的表达载体。