青蒿素衍生物对脉络膜黑色素瘤血管生成拟态抑制作用的研究

It was reported that Artemisinin Derivatives can inhibit tumor angiogenesis in recent years, but no research has been published about the affection of Artemisinin Derivatives on Vasculogenic Mimicry(VM) in Choroidal Melanoma(CM). In the preliminary study, we applied artesunate (ART) to animal model, found that ART had a significant inhibitory effect on ocular NV by downregulating the expression of VEGFR2, PKCα, and PDGFR. Moreover, we have confirmed that Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF) and Platelet Derived Growth Factor(PDGF) could promote Vasculogenic Mimicry formation in Choroidal Melanoma via activating the phosphatidyl inositol 3-kinase(PI3K) signal transduction pathway. Depending on these results, we put forward a hypothesis that Artemisinin Derivatives could inhibit PI3K signal transduction pathway by downregulating the expression of VEGF,VEGFR2 and PDGFR., so to inhibit the formation of Vasculogenic Mimicry, finally influence the proliferation and invading of Choroidal Melanoma. This research will clarify the molecular mechanism of Artemisinin Derivatives in the treatment of Choroidal Melanoma, enrich and develop traditional Chinese medicine antineoplastic theoretical basis, will exploit new direction in the clinical treatment of Artemisinin Derivatives on Choroidal Melanoma., has important theoretical and practical significances.

青蒿素及其衍生物能有效抑制肿瘤新生血管的发生，但是其对于脉络膜黑色素瘤（CM）血管生成拟态（VM）方面的研究尚未见报道。课题组在“中药青蒿味辛能散，味苦可降，可升降气机，使结滞之痰瘀松动而散，并可清透阴分之毒热邪气”的中医理论指导下，将青蒿琥酯（ART）应用于动物模型，前期研究发现，ART可通过下调VEGFR2，PKCα和PDGFR的表达抑制眼部新生血管形成，同时发现VEGF和PDGF通过激活PI3K信号转导通路促进CM中VM的形成。在此基础上，本项目提出ART或可通过抑制VEGF的分泌及下调VEGFR2和PDGFR水平，抑制PI3K信号转导通路的激活，从而抑制VM的形成，并最终影响CM的增殖和转移的新思路。本研究将阐明青蒿素衍生物通过活血化痰散结、清透热毒功效治疗CM的可能的分子病理机制，丰富和发展中医药抗肿瘤的理论基础，为青蒿素在CM的临床治疗方面开拓新方向，具有重要的理论和实践意义。

脉络膜黑色素瘤是一种具有高度转移倾向的眼内原发性恶性肿瘤，早期即可通过眼内静脉系统发生血行转移，严重威胁患者的生命。血管生成拟态（VM）是一种由肿瘤细胞形成的血管样通道来满足自身血供的模式，与肿瘤的侵袭、迁移和不良预后密切相关。青蒿素及其衍生物能有效抑制肿瘤新生血管的发生，但是其对于脉络膜黑色素瘤（CM）血管生成拟态（VM）方面的研究尚未见报道。本研究通过免疫组化实验证实脉络膜黑色素瘤组织中有VM形成，VEGF和PDGF因子在VM管腔周边阳性表达，说明VEGF和PDGF与脉络膜黑色素瘤的VM形成具有相关性。我们探索脉络膜黑色素瘤VM发生的作用机制发现，缺氧微环境可以促进脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α、VEGF-A、PDGF-B、CXCL1、TGF-β、SCF、IGF1和HGF等多种血管生长因子的表达，其中，VEGF-A对细胞存活和血管生成起关键作用，HIF-1α是启动VEGF和PDGF基因表达的上游基因，转录调控了VEGF/PDGF通路表达增加，从而促进了脉络膜黑色素瘤中的VM形成。本研究证实青蒿琥酯不仅能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成拟态形成，而且还能够阻断内皮细胞的血管生成模式，此外对人视网膜色素上皮细胞具有良好的安全性。机制研究发现，青蒿琥酯作用于脉络膜黑素色瘤，通过抑制HIF-1α/VEGF/ PDGF 通路及其相关因子 VEGFR2、PDGFR 和血管生成拟态相关基因 VE-cadherin 和 EphA2 的表达发挥抑制肿瘤生长和VM形成的作用。本研究阐明了青蒿琥酯通过活血化痰散结、清透热毒功效治疗脉络膜黑色素瘤的可能的分子病理机制，有望推动其作为临床抗肿瘤治疗的多靶点抗血管药物，丰富和发展了中医药抗肿瘤的理论基础，为青蒿素衍生物在脉络膜黑色素瘤的临床治疗方面开拓了新方向，具有重要的理论和实践意义及广阔的临床应用前景。