基于"组分-药效-靶点"作用网络研究四物汤制备工艺环节评价模式

It's not easy to select rational preparation by using single or just a few compounds as assessment index during the TCM preparation, which is easy to get the preparation "under controlled but ineffective" and has become a bottle-neck of TCM Modernizations. On the base of the combinational research model-"spectrogram-efficacy-case", this subject chooses classical gynecological formula-"Si Wu Tang" as object, putting forward the hypothesis that is the quality evaluation of Chinese Pattern Medicine can be characterization by the functional network, "composition-efficacy-target", to display logical levels of TCM medicine and mechanism.The process of this subject has been made as follows: At first, using chemical fingerprint to study composition of rat blood before and after the intragastric administration and to select potential composition; using metabolic fingerprint to study metabolites of animal models, of blood deficiency and original dysmenorrheal, before and after the medicine and to select effective target and speculate its original functional pathway; the second, using neural network and Game Model to analyze relationships of factors and to build functional network that is "composition-efficacy-target"; At last, making use of functional network to optimize "Si Wu Tang" preparation and build the on-ling evaluation system combined of dynamic composition and efficacy assurance.

中药复方制剂具有多成分、多靶点作用特性，其制剂工艺的"成分论"质控体系难以保障工艺优选合理性，使得制剂"控而不效"，一直是中药现代化进程的瓶颈和难点。本课题以临床经典"妇科圣方"四物汤为研究对象，在前期四物汤"谱-效-证"复合模型研究基础上，提出假说"中药复方制剂制备工艺的质量评价可通过"组分-药效-靶点"作用网络进行表征，以体现药物和机体应答的多层次性"。课题采用化学指纹技术对四物汤传统汤剂灌胃大鼠入血前后化学组分进行研究，筛选四物汤潜在活性组分群；应用代谢指纹足迹技术对血虚证和原发性痛经动物模型给药前后进行代谢组行为研究，筛选药效靶点，并推测其内源性作用通路；采用神经网络、博弈模型进行多因素交互分析，构建"组分-药效-靶点"作用网络；最后利用构建的评价网络优化四物汤制备工艺环节技术参数，实现制剂过程"组分"动态变化和"药效"质量保证的在线评价，为中药制剂制备工艺环节评价提供新思路。

本课题以临床经典“妇科圣方”四物汤为研究对象，通过“组分-药效-靶点”作用网络进行表征中药复方制剂制备工艺的质量评价，以体现药物和机体应答的多层次性”。主要研究内容：四物汤入血成分研究，HPLC指纹图谱研究，挥发性成分GC_MS分析，四物汤对急性血瘀模型、血虚模型、痛经模型的药效学研究，四物汤对血虚证、痛经证的代谢组学研究、四物汤“质”与“效”的灰关联度分析、重要有效成分的含量测定方法研究。在研究中体现了中国药典收载品种四物合剂的水提醇沉制备过程，在化学组分和药效作用研究均制备了四物汤蒸馏液、水提液、醇沉上清液、醇沉沉淀进行研究。课题重要结果：（1）四物汤挥发油中共检定出65种成分，其中含量最多的物质为藁本内酯，占总面积的57.78%。（2）比对当归-川芎蒸馏液、四物水煎液、四物醇沉上清液、四物醇沉淀物液HPLC指纹图谱发现，四个样品可明显区分，水提醇沉工艺降低了四物水煎液样品中部分成分的含量及四物水煎液和蒸馏液物质种类，使得有部分成分损失，醇沉后四物汤中芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、阿魏酸、梓醇、没食子酸6 种有效成分均减少。（3）四物汤对血瘀证、血虚证、痛经证有较好的治疗作用。（4）四物汤对原发性痛经证的治疗靶点主要是11-脱氧皮甾醇、溶血磷脂酸，其治疗作用与类固醇类激素合成、溶血磷脂酸代谢、氨基酸代谢有关；四物汤对血虚证的治疗靶点主要是N-苯甲酰甘氨酸，其治疗作用与氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢等有关；（5）对四物汤药效作用贡献程度较大的是梓醇、没食子酸、芍药苷等物质。本课题研究实现了制剂过程“组分”动态变化和“药效”、“靶点”的相关性质量保证，充分体现中药复方多成分、多层次、多渠道整体作用，为中药制剂制备工艺环节评价提供新思路。