肾母细胞瘤瘤体组织蛋白质标记物与相关炎症因子的筛查及特异性标记物鉴定

申请者前期国家自然科学基金项目研究发现：肾母细胞瘤患儿血清中存在特异性蛋白质标记物，而这些标记物是肿瘤特异性的还是炎症相关的尚不明确；肾母细胞瘤瘤体组织中是否存在与血清中类似的蛋白质标记物，这些蛋白质标记物在肾母细胞瘤患儿血清及肿瘤组织中的表达及表达强度亦不清楚，而明确标记物的特异性对早期特异性预报/诊断肾母细胞瘤意义重大。本课题组拟应用蛋白质组学技术，对肾母细胞瘤患儿和荷瘤动物模型的血清、癌组织、癌旁组织及正常组织进行对照筛选检测：采用SELDI-TOF-MS技术及双向凝胶电泳技术并行方式筛选出特异性蛋白质标记物峰值后，以肿瘤相关性的炎症因子作为参照，期望将与炎症因子峰值相同的特异性蛋白质标记物剔除，筛选出肾母细胞瘤特异性蛋白质标记物，应用液相色谱串联质谱法及蛋白质印渍技术对获得的特异性蛋白质进行鉴定及验证，找出肾母细胞瘤特异性蛋白质标记物。

肾母细胞瘤为小儿最常见的恶性实体肿瘤之一，早期诊断、早期治疗可使其存活率明显提高。申请者前期国家自然科学基金项目研究发现，肾母细胞瘤患儿血清中存在特异性蛋白质标记物，为了验证在肾母细胞瘤瘤体组织中是否存在相似的非炎症性蛋白质标记物，本研究通过表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测肾母细胞瘤患儿瘤体组织总蛋白，正常肾组织总蛋白，同时与重症感染患儿对照组血清进行对比，剔除炎症因子的干扰，筛选出特异的蛋白质标记物，运用聚丙烯酰胺凝胶电泳（TRICINE- SDS-PAGE）技术对目标蛋白进行纯化，收集目标蛋白。利用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MALDI-TOF/TOF）技术鉴定目标蛋白。所以，本研究的目的就是最大程度排除炎症因子的干扰，筛选和鉴定肾母细胞瘤瘤体组织中特异性蛋白质标记物。