结肠癌候选抑癌基因4.1N失活机制及生物学功能研究

结肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康。目前对结肠癌的病因及发病分子机制研究还很不足。近年来研究发现4.1家族成员是一类新的抑癌基因。本课题组前期研究通过免疫组化发现4.1N蛋白在结肠癌组织中表达明显下调甚至缺失，其中缺失占30%，明显下调占17%；进而发现在多种结肠癌细胞株中4.1N蛋白表达缺失以及基因存在杂合缺失；生物信息学显示4.1N基因在启动子区域有CpG岛结构。这些结果充分表明4.1N可能是一个新的结肠癌候选抑癌基因。本课题拟在基因水平检测4.1N基因在结肠癌中的失活机制，弄清其是否存在突变、杂合缺失及起动子甲基化；通过在细胞中导入4.1N基因和敲除4.1N基因实验，在功能上从正反两方面检测4.1N对结肠癌增殖、凋亡、粘附和迁移影响。本研究将为鉴定4.1N的抑癌作用提供充分依据，阐明4.1N在结肠癌发生中发挥的生物学功能，为结肠癌的诊断和治疗提供新的分子标记物。

结肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人民健康。近年来研究发现4.1 家族成员是一类新的抑癌基因。本课题组前期研究通过免疫组化发现4.1 家族成员4.1N 在结肠癌组织中表达明显下调甚至缺失，其中缺失占30%，明显下调占17%；进而发现在多种结肠癌细胞株中4.1N 蛋白表达缺失以及基因存在杂合缺失；生物信息学显示4.1N 基因在启动子区域有CpG 岛结构。这些结果充分表明4.1N 可能是一个新的结肠癌候选抑癌基因。本课题拟在基因水平检测4.1N 基因在结肠癌中是否存在突变、杂合缺失及起动子甲基化；在功能上通过导入4.1N 基因和敲除4.1N基因实验，从正反两方面检测4.1N 对增殖、凋亡、粘附和迁移的影响。研究结果表明，基因水平检测发现，4.1N基因在肿瘤细胞中存在广泛的杂合缺失，基因启动区甲基化明显。对细胞功能研究发现，4.1N基因缺失改变促进了细胞的增值，抑制了细胞的凋亡，通过改变细胞的形态，增强了细胞的迁移能力。并且研究发现，4.1N可调控EGFR蛋白表达，可能通过影响EGFR调控细胞。因此确定4.1N应该是结肠癌的抑癌基因。