CD147调控微环境pH梯度介导乳腺癌多药耐药的机制研究

近来人们越来越关注肿瘤微环境pH梯度调控细胞凋亡介导的多药耐药现象。研究表明，CD147分子与单羧酸转运蛋白（MCT）协同调控肿瘤微环境pH梯度参与乳腺癌多药耐药。然而，目前缺乏CD147、微环境pH梯度和凋亡相关蛋白三者在乳腺癌多药耐药中作用的研究。本项目首先选择CD147表达低/高的乳腺癌细胞株MCF/MDA-MD-231作为研究对象，通过转染获得CD147表达水平不一的细胞株，研究CD147、MCT和V-ATPase的表达和共存，检测细胞内外乳酸和pH值，明确各组细胞对临床常见化疗药物的敏感性及细胞凋亡情况，并采用凋亡芯片检测凋亡相关蛋白表达谱，最后一方面验证芯片靶凋亡相关蛋白的表达及效应，另一方面，构建乳腺癌裸鼠动物模型，进一步在体内水平印证，最终在体内外水平明确CD147 介导乳腺癌多药耐药的具体机制，为乳腺癌化疗耐药寻找新的逆转策略提供创新性的理论依据。

本项目探讨了CD147调控微环境pH梯度介导乳腺癌多药耐药的机制。首先选择CD147表达低/高的乳腺癌细胞株MCF-7/MDA-MB-231 作为研究对象，通过转染获得CD147 表达水平不一的细胞株，检测细胞内外乳酸和pH 值，研究CD147和MCTs、V-ATPase 的表达和共存，发现MCT-1、MCT-4、V-ATPase的表达与CD147有相关性，提示CD147可能通过影响MCT-1、MCT-4、V-ATPase的表达进而调控细胞内外的pH值；检测各组细胞对临床常见化疗药物的敏感性及细胞凋亡情况，发现CD147与乳腺癌细胞耐药相关；采用凋亡蛋白芯片检测凋亡相关蛋白表达谱，并验证了差异靶凋亡相关蛋白XIAP的表达，再次证明了CD147介导的多药耐药与XIAP密切相关，从而在细胞实验中证实：CD147可能通过影响MCTs、V-ATPase的表达进而调控细胞内外的pH值，影响凋亡蛋白XIAP的表达，导致细胞耐药，这一研究结果为乳腺癌化疗耐药寻找新的逆转策略提供理论依据。.我们利用人乳腺癌病理组织代替原项目中的动物模型，分析了CD147在化疗敏感乳腺癌、耐药乳腺癌中的表达差异，发现CD147通过影响ABCG2的定位及二聚体的形成介导乳腺癌的耐药，又进一步发现人乳腺癌组织中V-ATPase的表达明显升高，且各分子亚型的表达不同，以三阴性及HER2阳性乳腺癌亚组的表达最强，证实了V-ATPase与乳腺癌高危复发风险相关；经新辅助化疗后，化疗耐药组V-ATPase的表达仍很高，而化疗敏感组V-ATPase的表达较低，提示V-ATPase在乳腺癌的耐药中起作用。利用本项目研究经费，我们进一步探讨了银屑病和乳腺癌患者血浆中CD147表达的意义，发现银屑病患者血浆CD147的表达上调，在银屑病4种亚型中的表达存在差异，CD147有望成为新的银屑病治疗的靶分子，乳腺癌患者血浆CD147水平明显升高，且各分子亚型的表达有差异，证实了CD147在乳腺癌的高危复发风险相关。.本项目已基本完成，协助培养博士研究生1名，硕士研究生2名，相关科研论文在整理发表中。