小鼠DC与T细胞联合过继免疫防治GVHD的作用与机制

移植物抗宿主病(GVHD)和白血病复发是白血病同种骨髓移植后的主要并发症，但国际上还没有很好的措施防治GVHD同时保留移植物抗白血病(GVL)。我们的前期研究发现小鼠不成熟CD8α+DC可有效防治GVHD且不抑制已活化的CTL的杀伤功能，在此基础上我们提出"FasL-CD8α+DC联合T细胞可抑制GVHD并保留GVL"的设想。本研究将建立同种正常抗原负载的、表达FasL的CD8α+DC细胞模型，通过FasL-CD8α+DC筛选白血病抗原免疫鼠的T细胞，去除针对同种正常抗原和共同抗原的T细胞，而保留白血病特异性和非同种反应性T细胞，然后通过体内外试验证实FasL-CD8α+DC联合T细胞过继免疫防治GVHD的治疗效应，并阐明其作用的分子机制，为进一步确立DC联合T细胞防治GVHD和白血病复发的新措施，提供科学的理论和实验依据。

移植物抗宿主病（GVHD）和白血病复发是白血病同种骨髓/造血干细胞移植后的主要并发症和导致治疗失败的重要原因，防治GVHD的同时保留移植物抗白血病效应（GVL）目前国内外还没有很好的办法。树突状细胞（DC）有参与免疫耐受的功能，也可以诱导免疫应答参与移植物抗肿瘤效应，为产生免疫耐受防治GVHD的发生打开了新思路。本研究通过建立同种移植抗原负载以及白血病抗原负载的CD8α+DC细胞并将其与T细胞共培养，通过体内外试验观察抗原负载的DC细胞与T细胞共培养后在体外及动物模型上产生的防治GVHD及GVL效应，并阐明其作用机制，旨在建立DC联合T细胞过继免疫防治GVHD和白血病复发的新方法，已获得初步成功。主要结果：1. 建立了FasL-CD8α+DC细胞模型，通过体外试验证实了负载同种抗原的CD8α+DC体外可抑制T细胞活化产生耐受，负载白血病抗原的CD8α+DC与T细胞共培养可产生GVL效应，其作用机制主要是通过产生不同水平的IFN-γ和IL-10来实现的。2. 建立了小鼠红白血病加急性GVHD及大鼠的肾移植排斥等动物模型，并通过体内试验证实了同种抗原负载的DC联合T细胞可抑制小鼠GVHD，减轻病理反应，延长GVHD及肾移植动物的生存期。3. 通过microRNA芯片分析寻找DC与T细胞共培养后差异表达的miRNA，对其中的9个重要miRNA进行了real-time PCR验证，并对部分miRNA的调控通路进行了深入研究。研究结果为DC联合T细胞过继免疫防治GVHD的临床应用研究打下了良好的基础，为防治GVHD和白血病复发的新措施提供了科学的理论和实验依据。