TNFa及其下游分子miR-155在盐敏感性高血压及其相关血管内皮细胞功能障碍中的作用研究

Vascular endothelial dysfunction is closely associated with hypertension and vascular complications. How to repair damaged endothelial function is a hot topic in the field of cardiovascular and hypertensive diseases. We have previously shown that endothelial dysfunction in salt-sensitive hypertension was linked to upregulation of angiotensin II type I receptor (AT1R)/NFkB as well as decreased eNOS/NO signaling pathway, preinflammatory moelcule TNFa increased endothelial miR-155 expression and inhibited eNOS in endothelian cells, suggesting an important role of TNFa in induction of endothelial dysfunction. As a continuation of our previous studies, we propose to use a set of combinatory methods including knockout mice, bone marrow transplantation, gene transfection as well as evaluation of endothelial function to determine the molecular mechanisms of TNFa?and miR-155 in the induction of endothelial dysfunction associated with salt-sensitive hypertension. The proposed studies will identify TNFa/ miR-155 as downstream molecules of NFkB activation that induce endothelial dysfunction in salt-sensitive hypertension, and provide important scientific evidences for the development of new antihypetenvie therapy to target TNFa and its related molecules with the improvement of endothelial function.

血管内皮细胞功能障碍与高血压及其血管并发症密切相关，修复受损的内皮细胞功能是目前研究的热点。我们前期结果显示在盐敏感性高血压中血管内皮细胞功能障碍与血管紧张素ⅡI型受体（AT1R）/NFkB炎性通路的激活及内皮细胞eNOS/NO降低有关,在培养的血管内皮细胞中炎性细胞因子TNFa增加miR-155并抑制eNOS，提示TNFa在诱导内皮细胞功能损害中的作用。本研究拟在前期工作基础上，利用多种基因缺乏鼠，骨髓移植、基因转染和内皮细胞功能检测等方法，深入探讨TNFa/miR-155在盐敏感性高血压及相关内皮细胞功能障碍中的作用和机制，论证TNFa/miR-155是激活AT1R/NFkB信号通路的下游分子引起高血压，eNOS/NO抑制，血管内皮细胞功能障碍和靶器官损害的关键信号分子这一假说。由此探索修复内皮细胞障碍的靶分子，为开发以TNFa关联分子为靶标修复血管内皮细胞的抗高血压治疗尊定理论基础。

血管内皮细胞功能障碍与高血压及其血管并发症密切相关，修复受损的内皮细胞功能是目前研究的热点。 高血压与免疫功能失常有关，一些炎性细胞因子可促进血管内皮细胞激活损害内皮细胞功能。 在本项目探讨了炎性细胞因子TNF及其下游分子miR-155在盐敏感性高血压血管内皮功能障碍中的作用和机制。 主要研究内容：(1)通过TNF基因缺乏小鼠诱导DOCA-盐敏感性高血压，论证TNFa及其下游分子miR-155是引起盐敏感性高血压及其相关的血管内皮细胞功能障碍的作用和机制；（2）阐明在盐敏感性高血压血管壁TNFa来源以及引起TNFa增加的机制，特别是单核巨噬细胞AT1R受体在增加TNFa中的作用。 结果： 1）TNFa基因敲除降低DOCA-盐敏感性性高血压鼠的动脉血压，改善血管内皮细胞功能，增加eNOS表达，降低血管氧自由基和miR-155表达，减轻心脏和血管损伤；2）在体外培养的HUVEC，TNF增加miR-155，降低eNOS表达，抑制miR-155逆转TNFa对eNOS的抑制效应；3）在盐敏感性高血压鼠腹腔巨噬细胞AT1R 表达增加，ARB治疗能降低高血压鼠巨噬细胞和血管组织的TNF和miR-155表达，降低巨噬细胞在血管壁浸润，改善血管内皮细胞功能；4）在体外培养的巨噬细胞，Ang II刺激AT1R受体增加TNF表达并促进巨噬细胞激活，在盐敏感性高血压去除巨噬细胞明显降低血管壁TNFa,改善血管内皮细胞功能。 结论： TNFa可能是盐敏感性高血压血管内皮细胞功能障碍以及心脏血管结构损害的一个关键信号分子，其机制可能与增加miR155抑制eNOS和增加氧自由基有关。 在盐敏性高血压上调巨噬细胞AT1R引起巨噬细胞激活血管壁浸润可能是引起血管TNFa高表达的一个主要机制。 本研究结果对阐明盐敏感性高血压以及血管内皮细胞功能障碍的机制以及高血压血管并发症的防治，抗高血压药物的开发都具有重要的意义。