胚胎干细胞定向诱导分化为胰岛样细胞过程中表观遗传学稳定性的变化及其机理研究

ES细胞在长期培养和定向分化过程中可能出现表观遗传学改变，其机理不清，尚未见ES细胞分化为胰岛样细胞过程中表观遗传学稳定性的报道。本研究以小鼠ES细胞株SF1-1、SF1-G为材料，采用目前几种常用的方法，诱导ES细胞定向分化为胰岛样细胞，在分化的不同阶段观察细胞印记基因Igf2、H19、Cdkn1c、Kcnq1 表达的亲本来源， 印记调控区域DNA甲基化和组蛋白甲基化、乙酰化状态及其与印记基因表达调控的关系，并检测DNA甲基化过程中的关键酶系Dnmts在分化过程中的表达及活性的变化，并将分化后的表观遗传学正常和发生改变的胰岛样细胞移植至糖尿病鼠肾包膜下，观察移植后细胞的形态学变化、整体水平的降糖效应及移植后不同时期细胞表观遗传学的变化，以了解ES细胞定向分化为胰岛样细胞过程中以及移植后表观遗传学的改变和其可能的机制，从表观遗传学角度，为ES细胞在糖尿病细胞移植治疗领域的应用提供理论依据。