circR0031594抑制miR-146a调控慢性鼻-鼻窦炎IL-6/PI3K/Akt/GSK3β信号通路的作用及机制研究

CRS is a refractory disease, the current literature suggests that microorganism, inflammatory cells and inflammatory mediators involved in its pathogenesis, but it's still impercipient about this disease.Our previous datashowed that IL-6 through PI3K/Akt signaling pathway regulating the expression of GSK3β in CRS, which is one reason of the inflammation of CRS. But what and how to regulate IL-6/PI3K/Akt/ GSK3β excessive expression is not clear. Recently, we found circR0031594 and miR-146a were expressed highly in CRS through microarray, especially in nasal polyps. Accordingly, we assume that the inhibition of circR0031594 on miR-146a, participate in the IL-6 / PI3K/Akt/GSK3β signaling pathways in CRS, which maybe lead to chronic inflammation of CRS.To this end, we propose to detect the inhibitory effect of circR0031594 on miR-146a, as well as on IL-6/PI3K/Akt/GSK3β signaling pathway by nasal mucosa in vitro and in vivo, the aim fo this research is to explore more theoretical clue for immunotherapy of CRS.

CRS是难治性疾病，当前研究提示微生物、炎性细胞及炎症介质参与其发病机制，但对该疾病仍认识不足。我们前期研究结果显示IL-6通过PI3K/Akt信号通路调控GSK3β在CRS中的表达，参与CRS的慢性炎症。但对于调控IL-6/PI3K/Akt/GSK3β过度表达的相关分子及机理还不清楚。同时我们通过高通量筛查发现circR0031594和miR-146a在CRS，尤其是鼻息肉中高表达。据此，我们假设在CRS中，circR0031594抑制miR-146a, 参与IL-6/PI3K/Akt/ GSK3β信号通路，从而导致CRS的慢性炎症。为此，我们拟通过鼻黏膜体外培养和小鼠CRS模型，检测circR0031594对miR-146a的抑制作用，以及对IL-6/PI3K/Akt/GSK3β信号通路的影响，旨在为CRS的免疫治疗提供更多的理论依据。

1.慢性鼻窦炎领域. 我们探讨CRSwNP和对照组中circrna和mirna的表达，发现ECRSwNP和non-ECRSwNP的表达谱无统计学差异。CRSwNP与正常对照之间差异表达的circrna和mirna可能在CRSwNP的发病机制中起重要作用。hsa-circ-0031593和hsa-miR-145-5p是参与CRSwNP发生发展的最有力证据。此外我们利用CRSwNP患者的鼻活检标本和体外il -13成熟的人鼻上皮细胞分析上皮标志物和TJ蛋白。对IL-13成熟的hNECs和RV感染的hNECs进行上皮通透性、跨上皮电阻和TJs表达的定量分析。结果发现il -13介导的TJs功能障碍和上皮屏障受损。il -13诱导的纤毛缺失降低了鼻黏膜上皮对RV感染的病毒复制和抗病毒反应。最后我们比较了鼻内镜手术后鼻腔冲洗对CRSwNP表型的有效性。发现在CRSwNP术后早期，高渗海盐水对黏膜水肿和结痂有较好的抑制作用。nonECRSwNP患者在8周时显示出显著的LEKS和SCT改善。.2.变应性鼻炎领域. 我们采用免疫组织化学、qRT-PCR和western blot检测AR患者和对照组鼻黏膜TJs和PAR-2的表达，发现PAR-2通过下调ZO-1和claudin-1的表达参与了AR上皮屏障功能障碍的发生。我们比较了常规和集束特异性免疫治疗方案的有效性和副作用，发现二者的疗效相似，不随年龄变化而变化；两种方案都是安全可靠的。SPT有助于临床疗效的评估。我们还比较了双侧翼管神经切断术治疗AR的效果，发现该手术短期疗效优于SCIT，可能与手术降低了tIgE和sIgE水平有关。TNF-α可能参与其治疗机制。.3.鼻部肿瘤领域. 我们采用RNA-seq分析原发性鼻窦恶性黑色素瘤患者肿瘤组织和正常鼻黏膜组织中mRNA的表达，qRT-PCR验证RNA-seq的结果，免疫组织化学和蛋白质印迹法分析蛋白的表达，发现鼻窦恶性黑色素瘤组织中TYRP1、ABCB5和MMP17表达水平显著上调，其中ABCB5的表达与SNMM不良预后相关，疾病进展及不良预后的预测指标。我们回顾性分析鼻咽癌放疗后大出血患者临床资料，发现假性动脉瘤是鼻咽癌放疗后严重并发症，可导致大出血，病死率高。假性动脉瘤的形成与肿瘤分期高、再次放疗、局部骨质破坏和感染密切相关。首选血管内栓塞治疗。