抗蛋白尿药物在足细胞作用的分子机制探讨

已知足细胞裂孔隔膜复合体分子nephrin、podocin、CD2AP、neph1等及相关细胞骨架蛋白对维系裂孔隔膜结构、防止蛋白尿发生至关重要。抗蛋白尿药物是否也作用于足细胞裂孔隔膜相关分子而抑制或降低蛋白尿？我们前期发现抗蛋白尿药物在肾病鼠引起足细胞分子表达量和分布变化，但分子机制不清。本课题将应用免疫荧光、实时定量PCR、蛋白印迹、免疫共沉淀及TUNEL等技术检测足细胞的裂孔隔膜复合体及相关分子的分布、分子间反应、蛋白和mRNA表达及凋亡，分析药理作用机制不同的抗蛋白尿药物糖皮质激素、血管紧张素转换酶抑制剂和全反式维甲酸对嘌呤霉素所致足细胞损伤的保护和干预作用，及用RNA干扰技术分别敲低裂孔隔膜复合体分子、酪氨酸激酶抑制剂阻碍nephrin和neph1磷酸化，再分析不同药物的干预作用及作用的共同分子、主要分子或分子反应，以证实抗蛋白尿药物对足细胞及相关分子本身的作用及可能的分子机制。