Wnt2B细胞信号传导通路调控宫颈癌淋巴管新生及转移相关机制研究

Metastasis is the main reason for treatment failure and death in cervical cancer patients. Lymphatic metastasis is the main metastasis pathways in cervical cancer and lymph node metastasis with poor prognosis in cervical cancer patients. This study from the inner link tumor cells with lymphatic endothelial cellsz and provides new mechanism of cervical cancer lymphatic metastasis. Wnt2B is a glycoprotein signaling molecule, which has been confirmed that associated with development and metastasis in a wide variety of tumor.But its role in mechanism lymphatic metastasis of specific is not clear. It were detected the expression of Wnt2B in cervical cancer cell lines and tissues in our preliminary work. Meanwhile several experiment showed that the level of expression of wnt2b is associated with Lymphangiogenesis in vivo and in vitro. This project will adopt the lentivirus expression system to transfect wnt2B and Wnt2B-SiRNA to cervical cancer cells. And verifying whether exists the wnt2B autocrine and throught regulating the expression of its downstream target genes to regulate EMT and promote metastasis in cervical cancer. In addition, validate wnt2B whether by paracrine signaling pathways acting on the tumor stroma cells in cervical cancer and to promote lymph vessels and lymph metastasis. Whether block the Wnt pathway will restrain cervical cancer metastasis effectively.

转移是导致宫颈癌患者治疗失败和死亡的主要原因，淋巴转移是宫颈癌的主要转移途径，而淋巴转移对宫颈癌患者预后不佳。本课题从肿瘤细胞和淋巴管内皮细胞的内在联系入手,为揭示宫颈癌的淋巴转移机制寻找新靶点，提供新思路。Wnt2B是一个糖蛋白信号分子，已被证实与多种肿瘤发生发展及转移相关，但对其在淋巴管转移的具体作用机制还不清楚；我们前期工作中检测到宫颈癌细胞株和组织中均有Wnt2B信号通路分子的表达，多项体内外研究提示其表达水平与淋巴管生成相关。在此基础上，本项目将采用慢病毒表达系统将Wnt2B 和Wnt2B-SiRNA 分别转染宫颈癌细胞中，验证宫颈癌中Wnt2B是否存在自我分泌方式，通过调控其下游靶基因的表达，调控 EMT 而促进转移；另外，验证Wnt2B信号通路在宫颈癌中是否通过旁分泌方式作用瘤周间质细胞，促进瘤周淋巴管生成和淋巴道转移，以及阻断Wnt通路是否有效抑制宫颈癌转移。

转移是导致宫颈癌患者治疗失败和死亡的主要原因，淋巴转移是宫颈癌的主要转移途径，而淋巴转移对宫颈癌患者预后不佳。本课题从肿瘤细胞和淋巴管内皮细胞的内在联系入手,为揭示宫颈癌的淋巴转移机制寻找新靶点，提供新思路。Wnt2B 是一个糖蛋白信号分子，已被证实与多种肿瘤发生发展及转移相关，但对其在淋巴管转移的具体作用机制还不清楚；本研究通过检测宫颈癌细胞株和组织中Wnt2B 信号通路分子的表达，结合国内外多项体内外研究提示其表达水平与淋巴管生成相关。在此基础上，我们采用慢病毒表达系统将 Wnt2B 和 Wnt2B-SiRNA 分别转染宫颈癌细胞中，验证下调 Wnt2B 的表达可以抑制宫颈癌细胞的侵袭转移能力；同时亦可抑制淋巴管内皮细胞的生长、发芽和成管能力，而高表达 Wnt2B 信号分子的肿瘤细胞粘附能力下降，迁移侵袭能力增强，促进宫颈癌肿瘤间质淋巴管生成和淋巴道转移；肿瘤相关LECs 分泌 Wnt2B 信号通路分子趋化肿瘤细胞定向迁移侵入淋巴系统形成转移瘤。在蛋白水平也验证了Wnt2B可能通过调节EMT/ PAI-1发挥调节宫颈癌的发生和转移。此外通过对不同级别的宫颈病变组织组织通过免疫组织化学技术检测 Wnt2B、E-cadherin 等蛋白在宫颈癌组织中的表达；Wnt2B及E-cadherin在宫颈癌组中的表达，随着恶性程度的增加，Wnt2B的表达逐渐增强，而E-cadherin表达则相反，呈现逐渐减弱；宫颈癌组织中Wnt2B表达的高低与患者的病理类型相关，而与患者年龄、临床分期、淋巴结转移与否无明显关系。在斑马鱼模型及小鼠角膜肿瘤微袋模型中也验证了沉默Wnt2B后可以明显抑制肿瘤的生长及肿瘤内淋巴管的生成。.本项目从组织、细胞、分子三个层面全面探讨Wnt2B在肿瘤淋巴转移过程中的作用及其机制，并进行动物实验。本研究阐述基因Wnt2B在宫颈癌淋巴转移中的生物效应及作用机制，丰富宫颈癌淋巴转移的信号分子研究，为及早发现并治疗宫颈癌淋巴转移提供新的多相位阻遏靶点。我们有理由相信，随着对Wnt2B信号通路在肿瘤转移中作用机制的明确和新的靶向治疗药物的研发，在不久的将来，困扰医患多年的宫颈癌治疗现状将会迎来新的转机。