自噬在动脉粥样硬化血管平滑肌细胞丢失中的作用及调节

动脉粥样硬化斑块不稳定甚至破裂，是急性冠脉综合症的主要病理学基础。血管平滑肌细胞数量减少是导致斑块不稳定的重要原因，凋亡作为血管平滑肌细胞丢失的机制已被深入研究。程序性细胞死亡不仅局限于凋亡，还包括自噬性死亡，然而自噬在动脉粥样硬化血管平滑肌细胞减少中的作用及调控机制尚不清楚。我们最近发现，Egr-1在动脉粥样硬化中表达增加，并且Egr-1缺失明显抑制移植静脉再狭窄的粥样斑块形成。新近一项研究发现Egr-1诱导自噬增强。故推测：自噬可能被Egr-1介导，并与动脉粥样硬化血管平滑肌细胞丢失有关。本项目拟从动物和细胞水平，研究自噬在动脉粥样硬化血管平滑肌细胞减少中的作用，并用RNA干扰的Egr-1质粒（pSUPER-Egr-1）转染血管平滑肌细胞，探讨Egr-1对自噬的调控作用及其机制，以期为逆转血管平滑肌细胞丢失、稳定斑块提供新的思路和理论依据。

本项目探讨自噬在动脉粥样硬化血管平滑肌细胞丢失中的作用及其调节，研究发现干预自噬对动脉粥样硬化氧化低密度脂蛋白（oxLDL）所致的血管损伤没有明显影响。自噬相关蛋白在小鼠动脉粥样硬化主动脉壁的表达修饰未发生显著性改变。我们惊奇地发现，自噬在小鼠急性心肌梗死发生后心梗周边区急剧上升，而后迅速下降。体外H9C2心肌细胞氧葡萄糖剥夺后自噬被迅速激活，1h达到最高水平，而后迅速下降。以上结果提示自噬可能是心肌缺血损伤后的急性代偿性应激反应，但缺血状态持续使得心肌细胞自噬进入失代偿期，即自噬下降至基础水平。然而自噬在急性心肌梗死后心肌重构中的变化规律及其发挥的作用及机制尚不十分清楚。我们在小鼠冠状动脉左前降支结扎后心肌梗死模型中观察自噬的动态变化，并研究干预自噬对心肌梗死的影响。实验发现给予Rapamycin明显诱导自噬，改善急性心肌梗死小鼠收缩功能障碍，并降低梗死面积，逆转急性心肌梗死后心肌重构。给予3-MA明显抑制自噬，对急性心肌梗死小鼠收缩功能障碍无改善作用，并增加梗死面积，加重心梗周边区心肌细胞丢失，加重心肌纤维化。体外给予Rapamycin增强H9C2心肌细胞自噬，并明显逆转氧葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤；自噬增强明显抑制氧葡萄糖剥夺引起的NF-κB激活及其转录活性，提示自噬增强可能通过抑制NF-κB活化发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤作用。本课题为自噬在心血管疾病中的作用提供新的实验数据，也为急性心肌梗死的临床治疗开拓新的思路。