温肾消癥汤调节STAT3信号通路抑制异位子宫内膜间质干细胞增殖和迁移的机制研究

Wenshen Xiaozheng Tang(WXT)has been used as hospital independent intellectual property preparations in clinical for the treatment of Kidney deficiency and blood stasis type of endometriosis,whica had got good therapeutic effect. But the specific pathways and mechanism of WXT treated for endometriosis (EMS) is still unclear. Endometrial stem cells are the causes of persistent ectopic lesion. JAK - STAT3 signaling pathway play an important role in the proliferation, invasion, metastasis and other biological behavior of stem cells.We previously found that WXTregulated the proliferation and migration of ectopic endometrial mesenchymal stem cells (MSCs) and supressed the phosphorylation level of STAT3 in ectopic endometrial MSCs. Based on the previous study, we plan to explore whether Wenshen Xiaozheng Tang specially regulates the proliferation and migration of ectopic endometrial MSCs, whether the effect of Wenshen Xiaozheng Tang on regulating endometrial MSCs self-renewal, proliferation and migration depends on STAT3 signaling pathway, and what the potential targets are. We will further verify the results by in vivo animal experiments. The objectives of this study are to provide a scientific evidence and theoretical basis for Wenshen Xiaozheng Tang in clinical treatment of EMs.

温肾消癥汤（WXT）为我院具有自主知识产权的治疗肾虚血瘀型子宫内膜异位症（EMs）经验方,用于临床治疗取得了满意疗效，但该方治疗EMs具体作用途径与机理尚不清楚。子宫内膜干细胞是EMs异位病灶持续存在的原因，而JAK-STAT3信号通路在干细胞的增殖、侵袭、转移等多种生物学行为中发挥重要作用。我们前期研究发现异位子宫内膜间质干细胞（MSCs）中STAT3组成型活化，而WXT可以降低MSCs中STAT3的磷酸化水平并抑制异位子宫内膜MSCs增殖和迁移。推测WXT可能是通过STAT3信号通路调控异位子宫内膜MSCs增殖和迁移达到抑制子宫内膜异位症的进展。本项目拟在既往研究的基础上，分析WXT汤抑制异位子宫内膜MSCs增殖和迁移的特异性，探讨其抑制异位子宫内膜MSCs增殖和迁移是否依赖STAT3通路以及其具体靶点，最后进行动物体内验证，为温肾消癥汤临床治疗EMs提供新的科学依据和理论基础。

子宫内膜异位症常表现为痛经、慢性盆腔痛、性交痛和不孕，病程长且反复发作，临床无根治措施，手术和激素药物无法解决复发和副作用大的难题。最近研究表明异位子宫内膜间质干细胞在异位病灶的生长维持中发挥关键作用，以异位内膜间质干细胞为靶点阻止病灶生长迁移是治本的方法，且不影响激素水平，不易产生副作用。本项目以磁珠分选法分离得到表型单一、活性好、得率高的正常内膜及子宫内膜异位症患者在位、异位内膜来源的间质干细胞。发现温肾消癥汤可以抑制子宫内膜异位症患者异位内膜间质干细胞增殖和迁移，而且对异位内膜间质干细胞的抑制作用强于正常、在位内膜间质干细胞，对间质干细胞的抑制作用强于非干细胞，说明温肾消癥汤治疗子宫内膜异位症具有细胞选择性。进一步发现温肾消癥汤对异位内膜间质干细胞增殖和迁移的抑制作用是通过降低STAT3通路的活化水平实现的。温肾消癥汤通过抑制JAK2降低STAT3的活化水平，并抑制STAT3的共转录因子NF-κB的活性，从而下调抗凋亡蛋白c-IAP1、c-IAP2、XIAP和survivin的表达，下调促迁移蛋白COX-2和MMP-9的表达，诱导异位子宫内膜间质干细胞凋亡，并抑制异位子宫内膜间质干细胞的迁移能力，最终对子宫内膜异位症发挥治疗作用。并在动物整体水平验证了温肾消癥汤对子宫内膜异位症增殖、迁移和对STAT3活化水平的抑制作用，明确了温肾消癥汤通过STAT3抑制异位内膜间质干细胞增殖和迁移的作用机制，为温肾消癥汤临床治疗子宫内膜异位症提供科学依据，为开发新的子宫内膜异位症治疗药物提供理论基础。本项目已发表论文5篇，其中3篇SCI论文，1篇中文核心论文，1篇科技核心论文；获得国家发明专利授权1项；获得江苏中医药科学技术三等奖1项。