赭曲霉毒素A对人胃黏膜上皮细胞（GES-1）DNA损伤的诱导作用及在胃癌发生中的意义

饮食中真菌毒素的污染与人类疾病的发生关系密切。赭曲霉毒素A（OTA）是"可能的人类致癌物"。申请者前期调查发现我国胃癌高发区居民食用小麦中OTA的污染严重，体外研究发现OTA可诱导人胃黏膜上皮细胞（GES-1) 发生G2期阻滞，预实验显示OTA可导致细胞DNA链断裂。但目前有关OTA与胃癌发生关系的研究国内外未见报道。本研究拟在前期研究的基础上，从DNA氧化损伤的角度入手，利用流式细胞术、彗星实验和高效液相色谱法-电化学检测技术观察OTA对GES-1细胞DNA的损伤作用；利用激光共聚焦等技术探讨OTA诱导的GES-1细胞G2期阻滞与DNA氧化损伤的关系；建立修复基因低表达的细胞株，评价修复障碍与DNA氧化损伤的关系；最后通过体外细胞转化实验揭示OTA在人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程中所起的作用。以期进一步阐明OTA对人胃黏膜上皮细胞的损伤作用，为揭示OTA与胃癌发生的可能关系提供科学依据。

饮食中真菌毒素的污染与人类疾病的发生关系密切。赭曲霉毒素A（OTA）是“可能的人类致癌物”。申请者前期调查发现我国胃癌高发区居民食用小麦中OTA的污染严重，体外研究发现OTA可诱导人胃黏膜上皮细胞（GES-1) 发生细胞周期紊乱。本项目在前期研究的基础上，通过对赭曲霉毒素A（OTA）致人胃黏膜上皮细胞 (GES-1)氧化DNA损伤作用机制的深入探讨，揭示OTA的高污染与胃癌发生的可能关系。结果显示，OTA处理人胃黏膜上皮细胞可以导致细胞的氧化应激损伤。另外，结果显示OTA可以通过下调Rad51的表达，抑制同源重组修复(HR)途径，而参与GES-1细胞的DNA损伤以及周期紊乱；同时，研究进一步提示ERK、p38和p53信号通路参与调控了这一过程。最后，利用体外转化实验将OTA暴露GES-1细胞40周，结果发现长期暴露OTA可以增加GES-1细胞的迁移性和侵袭性，使细胞发生恶性转化，并利用该转化细胞株成功建立了裸鼠成瘤模型。同时研究还进一步发现氧化应激参与了OTA诱导的胃黏膜上皮细胞恶性转化。该研究项目为河北省胃癌高发区胃癌的合理防治提供了科学依据。