癌细胞中野生型与突变型p53蛋白质同时检测的表面等离子体激元共振（SPR）传感器研究

癌症抑制转录因子p53在遏止肿瘤细胞生长、DNA修复、以及细胞程序化死亡等方面扮演着十分重要的角色，超过50%的癌症病人中p53基因发生了突变。测定癌细胞中野生型（没有发生突变的型体）以及突变型p53蛋白质的浓度消长关系对癌症的早期诊断具有重要的生物学意义。本项目拟采用流动注射-表面等离子体激元共振技术（SPR）在同一个芯片上建立同时检测癌细胞中野生型以及突变型p53蛋白质的分析方法，克服了传统的酶联免疫吸附分析操作步骤烦琐、且使用酶标抗体的缺陷。此外，同一SPR芯片上野生型与突变型p53蛋白质的同时测定克服了以往不同方法、不同技术检测的不确定性。在此研究基础上探讨提高SPR传感器的灵敏度、选择性和稳定性等主要性能指标的途径。这方面的研究突破将对免标记、高灵敏、高选择性检测癌细胞中p53的变异有所贡献，对临床上癌症早期诊断这一复杂科学问题的研究起到促进作用。

p53在遏止肿瘤细胞生长、DNA修复、以及细胞程序化死亡等方面扮演着十分重要的角色，超过50%的癌症病人中p53基因发生了突变。检测正常人细胞以及癌细胞中野生型以及突变型p53蛋白质的浓度消长对癌症的预警及早期诊断具有重要的生物学意义。1） 采用流动注射-表面等离子体激元共振技术（SPR）在同一个芯片上建立同时检测癌细胞中野生型以及突变型p53蛋白质的分析方法 (Anal. Chem. 2009, 81, 8441-8446)。研究成果在美国化学会（American Chemical Society, ACS）网站上作为亮点文章突出显示。这方面的研究突破对免标记、高灵敏、高选择性检测癌细胞中p53的变异有所贡献，对临床上癌症早期诊断这一复杂科学问题的研究起到促进作用。2） 采用流动注射-SPR研究了p53与脱金属的金属硫蛋白（apo-MT）之间的相互作用。该研究对金属蛋白调制的p53构型变化以及转录活性研究具有重要生物学意义。研究成果发表在Anal. Bioanal. Chem.（2009, 395, 2569-2575）。基于与癌症相关的p53蛋白质方面的研究成果，受邀为国际知名杂志Curr. Pharm. Biotechnol. 撰写综述文章（2010，11，122-127）。 . Aβ（β-淀粉样蛋白）是一种多肽，以单体、寡聚体、原始纤维、纤维等多种形式存在。在脑脊髓液中高丰度的Aβ(1–40)与易聚集的Aβ(1–42) 的浓度比是 阿尔茨海默病（AD）早期诊断的重要依据。采用SPR技术测定出AD病人脑脊髓液中Aβ(1–40)与Aβ(1–42)的浓度比大约是正常人的2倍。研究成果发表在美国化学会杂志 Anal. Chem. (2010, 82, 10151-10157)。由于在用SPR检测老年神经退行性疾病标志物方面的成就，应邀为英国皇家学会撰写综述（RSC Advances, 2012, 2, 2200-2204）。. miRNA是一组含有19-25个核苷酸的非编码RNA，是肿瘤发展过程中有效的标志物。采用电化学结合竞争杂交模式建立了灵敏检测癌细胞中miRNA的分析方法（Anal. Chem. 2012, 84, 6400-6406），研究成果对临床上癌症早期诊断这一复杂科学问题研究起到促进作用。