压力信号对增生性瘢痕成纤维细胞胶原代谢紊乱调节的分子机制

TGF-beta1/smad 信号传导通路在创伤后瘢痕形成增生、消退过程中起着重要的调控作用。基于压力治疗增生性瘢痕在临床应用已取得了良好疗效的事实，本研究拟采用细胞柔性压力加载系统（FX-400）制作压力干预体外细胞培养的人增生性瘢痕成纤维细胞模型，通过蛋白印迹、Q-RTPCR 等技术研究不同压力条件下细胞内金属蛋白酶的表达与胶原代谢之间的动态关系，同时观察TGF-β1/smad通路及其中间分子对胶原合成与降解动态平衡的影响，并利用裸鼠增生性瘢痕模型在体实验，旨在获得压力信号对胶原代谢平衡紊乱的调节分子作用的关键点，初步阐明力学信号在瘢痕重建过程中的机制及信号传导通路调控，为压力治疗促使增生性瘢痕向萎缩性瘢痕转变这一现象提供分子生物学线索，为创伤（烧伤）愈合后如何少瘢痕或无瘢痕愈合的探索开拓新的途径。

TGF-beta1/smad 信号传导通路在创伤后瘢痕形成增生、消退过程中起着重要的调控作用。基于压力治疗增生性瘢痕在临床应用已取得了良好疗效的事实，本研究采用细胞柔性压力加载系统（FX-4000T）制作压力干预体外原代细胞培养的人增生性瘢痕成纤维细胞，模拟临床压力治疗的模型，通过蛋白印迹、qRT-PCR 、免疫组化，RNA干扰等技术研究不同压力条件下细胞内金属蛋白酶的表达与胶原代谢之间的动态关系，实验结果表明：1）我们优化了增生性瘢痕原代培养的条件，成功培养鉴定并传代原代细胞。2）由于临床患者个体之间存在差异性，我们建立了纳入压力治疗的分子标准，筛选出符合条件的标本进行下一步研究；3）TGF-β1/smad通路及其通路的中间分子调控胶原合成与降解的动态平衡，并初步证明smad3在压力条件下调控MMP9，MMP2发挥压力治疗的效果，而smad2在压力条件下未发生显著改变；4）裸鼠增生性瘢痕模型体内实验也表明相似的结果，但是对于压力治疗裸鼠并非完善的模型，有待进一步研究。上述研究获得压力信号对胶原代谢平衡紊乱的调节分子作用的关键点，初步阐明力学信号在瘢痕重建过程中的机制及信号传导通路调控，为压力治疗促使增生性瘢痕向萎缩性瘢痕转变这一现象提供分子生物学线索，为创伤愈合后如何少瘢痕或无瘢痕愈合的探索开拓新的途径。