内生真菌对宿主雷公藤化感作用的影响及调控效应研究

本项目是在前期从药用植物雷公藤分离鉴定出32株内生真菌的研究基础之上，通过共生体构建及化感效应评价，筛选对宿主雷公藤化感效应具有显著影响的内生真菌。以筛选出的内生真菌为研究对象，采用组培、土培及细胞悬浮培养等研究方式，考察了内生真菌对宿主他感和自毒效应的影响，分析了内生真菌在宿主自毒应答中的作用及调控效应，并结合内生真菌-宿主细胞共培养及真菌诱导子添加技术，探讨了内生真菌影响植物化感效应的作用机制。本课题对揭示植物化感作用的本质，制定合理有效的化感调控措施具有重要意义。

雷公藤是珍贵药用植物，对其混交种植过程中的化感作用进行研究具有重要的实际意义。本项目以筛选的对宿主雷公藤化感效应具有显著影响的内生真菌为研究模型，探讨了内生真菌对宿主雷公藤化感作用的影响及调控机制。结果表明：菌株NS-5对杉木种子的萌发表现出最强的抑制作用，萌发率仅为29.67%，化感作用指数高达0.4765，NS-5菌株经ITS-rDNA序列鉴定为Penicillium Spinulosum。分别对内生真菌、雷公藤愈伤组织进行单独和悬浮共培养实验，发现NS-5内生真菌培养液对杉木种子萌发的抑制作用要强于雷公藤愈伤组织培养液，而真菌－雷公藤共培养体系则对杉木组培苗表现出最强的的抑制作用。不同培养液的色谱检测结果表明，9种培养液的色谱图基本相似，说明其培养液中含有的化合物基本相同或相似，依据峰面积初步断定这些化合物在浓度上存在一定的差异。内生真菌培养液和悬浮共培养液中的化合物浓度要略高于愈伤组织培养液，此结果可能是导致前两者在对杉木种子萌发和杉木组培苗生长过程中化感作用和胁迫伤害要强于后者的重要原因。