BRM、p53对细胞周期素D1基因热激转录抑制调控机制的研究

细胞周期素D1是一个G1/S关键因子,BRM可能调控其转录水平。申请人前期的研究表明热激抑制cyclin D1转录活性,其中p53起关键作用,并且出现组蛋白乙酰化程度下降。因此，申请人设想热激诱导BRM和p53相互作用并募集HDAC等转录抑制性复合物,抑制cyclin D1转录。.本项目拟将以p53结合热激效应区域并起关键作用为基础,分析胞周期素D1启动子热激效应区域BRM和p53的结合、相互作用以及对HDAC等的募集。通过转染过表达的p53删切突变表达质粒,竞争性地和启动子上BRM以及HDAC等结合，通过染色质免疫沉淀技术分析p53如何与BRM相互作用以及募集HDAC。BRM和p53在热激条件下的染色质重塑作用,通过限制性内切酶易感性检测染色质高级结构的变化来验证。本研究将为cyclin D1的热激染色质重塑调控机制,以及深入研究cyclin D1的表观遗传调控机制提供实验依据。