Gpr177基因在卵巢发育过程中的功能研究

Wnt信号通路在卵巢发育过程中起重要作用，参与缪勒氏管及其派生器官的形成，调控卵泡发育、排卵及黄体化等生理过程。Gpr177基因编码一种跨膜蛋白，传送Wnt分子至细胞表面，是Wnt蛋白分泌过程中必需的运送受体。我们前期实验结果显示Gpr177基因在小鼠早期胚胎的卵巢组织中高表达，可能参与卵巢的早期发育过程；定量PCR结果显示Gpr177基因在幼龄小鼠卵巢中被hCG诱导表达，表明其可能参与排卵及黄体化过程。本项目通过构建"卵巢体细胞特异性Gpr177基因敲除"和"卵巢体细胞特异性Gpr177基因敲除/β-catenin激活"两种基因突变型小鼠，利用基因敲除小鼠卵巢体外培养及补偿性过表达体系，研究Gpr177基因在卵巢发育中的功能及作用机理。本研究阐释Gpr177基因在哺乳动物卵巢发育中的遗传学功能，揭示卵巢中Wnt分子的分泌调控模式，使我们更加全面地认识Wnt信号通路在卵巢发育过程中的作用。

Wnt信号通路在卵巢发育过程中起重要作用，参与缪勒氏管及其派生器官的形成，调控卵泡发育、排卵及黄体化等生理过程。Gpr177基因编码一种跨膜蛋白，传送Wnt分子至细胞表面，是Wnt蛋白分泌过程中必需的运送受体。定量PCR结果显示Gpr177基因在幼龄小鼠卵巢中被hCG诱导表达，原位杂交结果显示Gpr177基因在黄体中信号很强，表明其可能参与排卵及黄体化过程。本项目利用卵巢颗粒细胞特异性Cre酶活的Amhr2(cre/+)小鼠与Gpr177(fl/fl)小鼠交配获得Amhr2(cre/+);Gpr177(fl/fl) 基因型小鼠，研究了Gpr177基因在卵巢发育中的功能及作用机理。研究结果显示：（1）突变体雌性小鼠生育率降低；（2）突变体小鼠黄体形成有缺陷；（3）黄体形成的marker基因Cyp11a1, Lhcgr与 Star表达明显下降；（4）突变小鼠血清中孕酮水平下降明显；（5）突变小鼠排卵与野生型相比无显著性差异；（6）卵泡颗粒细胞增殖无显著性差异，但凋亡增加；（7）突变小鼠输卵管发育异常，没有自然弯曲；（8）原位杂交显示Wnt4与Wnt10b与Gpr177都在黄体中高表达，表明Gpr177可能通过调控Wnt4及Wnt10b的分泌来影响黄体化过程；（9）通过比较野生与突变小鼠卵巢中基因表达差异，发现Plk等基因可能受到Wnt信号通路调控，我们分别对这几个基因在围排卵期的表达与功能进行了相关研究。本研究阐释Gpr177基因在哺乳动物卵巢发育中的遗传学功能，揭示卵巢中Wnt分子的分泌调控模式，使我们更加全面地认识Wnt信号通路在卵巢发育过程中的作用。