MiR-23b参与类风湿关节炎（RA）发病及其分子机制研究

RA为系统性自身免疫性疾病,Ⅱ型滑膜细胞(FLS)在其发病及进展中处于核心地位。小RNA为调节性RNA，参与RA发病。本小组用小RNA芯片鉴定了RA、骨关节炎及正常FLS中差异表达的小RNA，通过定量PCR确证了相关指标。发现miR-23b在RA FLS及滑膜组织表达显著高于正常组；炎症介质显著上调其在RA FLS表达。MiR-23b可抑制FLS基础水平及炎性介质刺激引起的MMP3表达。因此提出miR-23b通过负反馈机制抑制RA发病及进展，本研究拟采用原位杂交结合免疫组化明确其在RA滑膜组织表达情况；通过慢病毒载体介导的过表达及抑制剂抑制其功能，明确其对FLS生物学效应，特别是对FLS增殖及分泌炎症介质的影响；通过cDNA芯片筛选其在RA FLS中的靶点并验证，确证其效应为潜在靶点依赖性；用小鼠关节炎模型体内验证其抑制RA的生物学效应。阐明其参与RA发病的分子机理，为RA治疗提供新思路。

类风湿关节炎（RA）为系统性自身免疫性疾病,Ⅱ型滑膜细胞(FLS)在其发病及进展中处于核心地位。已有文献报道小RNA参与RA发病。前期实验中本小组利用小RNA芯片鉴定了RA、OA及正常FLS中差异表达的小RNA，发现miR-23b在RA FLS及滑膜组织表达显著高于正常组；炎症介质显著上调其在RA FLS表达。本小组采用探针原位杂交明确了相对于正常滑膜组织，miR-23b在RA滑膜高表达，主要集中于FLS和微血管内皮细胞；通过慢病毒载体介导的过表达及抑制病毒抑制其功能，明确其促进FLS分泌IL-6，MMP3等炎症介质，提高FLS的增殖速率；通过免疫印迹法证实其促炎作用是通过激活NF-κB，Erk1/2和Smad2/3信号来实现的；通过双荧光报告系统，本小组证实miR-23b与预测一致，通过结合TGFβR2上两个位点，调控其表达。此外，对其宿主基因APO的研究发现APO同样在RA滑膜中高表达，其表达受TLR通路的调控；APO过表达激活多条炎症通路；在RA中APO和miR-23b表达显著呈正相关。综上，本研究初步阐明miR-23b参与RA发病的分子机理，为RA治疗提供了新思路。