人源化CYP450转基因动物模型在药物代谢研究中的应用

本课题将采用Cre/loxP重组酶系转染精原干细胞与胞浆内显微操作机器人注射技术相结合的方法, 将人类特异性大片段CYP450 3A4/5基因簇完整导入啮齿类卵细胞, 并使之在其子代稳定地得以表达。本研究目的不仅在于突破实验动物与人之间的"遗传物种壁垒",更期望通过在基因水平操作、进而在人源化动物活体内从RNA、蛋白质、组织细胞以及整体水平动态地观察药物代谢过程的全貌。该模型将较之以往体外CYP450转基因细胞系、或单拷贝基因敲除动物模型, 更能真实地反映药物对人体内代谢表型和基因型的影响。本课题亦拟采用微操作机器人技术，探索和建立与人源化药物代谢酶大片段基因操作相适应的基因芯片检测新方法，以期更为快速、大规模和高通量地观察药物在基因水平的代谢途径和调控机制。经国家知识产权局专利局检索查新证实，本课题具有明显的新颖性，有望取得具有我国自主知识产权的研究成果。