应用PF-2D分析技术筛选乳腺癌化疗耐药分子标志物的实验研究

乳腺癌已成为严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见恶性肿瘤，化疗是其综合治疗的主要手段之一，而肿瘤化疗失败的主要原因是缺乏对患者个体化疗敏感性具有预测作用的分子标志物。本研究首先应用阿霉素、紫杉醇、氟脲嘧啶、甲氨蝶呤等化疗药诱导乳腺癌MCF-7细胞，建立体外耐药细胞模型；建立PF-2D和质谱技术分析药敏与耐药细胞蛋白表达模式的方法，应用ProteoVue软件系统筛选差异蛋白组。其次，研究3种标准化疗方案CMF、CAF、TAC低剂量诱导荷瘤裸鼠，建立体内乳腺癌荷瘤裸鼠多药耐药模型，依托PF-2D分析体系，分析耐药和对照组肿瘤组织蛋白表达的差异性。比较体内、外乳腺癌耐药模型所获得的差异蛋白组，筛选与鉴定一组乳腺癌耐药分子靶标；对其中寻找到的新关键蛋白，采用RNA干扰技术验证，确定是否为乳腺癌耐药相关蛋白。以期筛选出对乳腺癌个体化疗疗效具有预测作用的分子标志物，同时为寻找新的抗肿瘤药提供新靶点

乳腺癌已成为严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见恶性肿瘤，化疗是其综合治疗的主要手段之一，而肿瘤化疗失败的主要原因是缺乏对患者个体化疗敏感性具有预测作用的分子标志物。本研究应用阿霉素、紫杉醇、氟脲嘧啶、甲氨蝶呤等化疗药诱导乳腺癌MCF-7/S细胞，建立体外耐药细胞模型；建立PF-2D、2-DE和质谱技术分析药敏与耐药细胞蛋白表达模式的方法，应用ProteoVue软件系统筛选差异蛋白组。其次，研究2种标准化疗方案CAF和TAC低剂量诱导荷瘤裸鼠，建立体内乳腺癌荷瘤裸鼠多药耐药模型，分析耐药和对照组肿瘤组织蛋白表达的差异性。比较体内、外乳腺癌耐药模型所获得的差异蛋白组，鉴定出一系列乳腺癌耐药分子靶标，为进一步筛选出对乳腺癌个体化疗疗效具有预测作用的分子标志物提供了重要的基础数据。