调节白介素10受体泛素化的机制及其对白介素10信号传导和功能的影响

免疫系统失调及相关疾病严重危害着人类健康。免疫调节细胞素的表达、功能紊乱被认为是导致免疫失调的关键性因素。因而如何调节、改善紊乱的细胞素网络是治疗免疫失调的主要方向。白介素10（IL-10）及其受体是体内起主要抑制免疫功能的细胞素系统，对其功能的合理调节有可能使正常细胞素网络恢复而达到治疗效果。这里，我们提出IL-10受体亚基IL-10R1的泛素化可能是一个负向调控IL-10功能的重要机制。我们计划确立调节IL-10R1泛素化的连接酶，研究泛素化对IL-10R1信号传导的调节方式，以及揭示特异性激活IL-10R1泛素化的上游激酶通路。我们同时希望通过以不同角度抑制IL-10R1泛素化通路来验证该调节机制的重要性，并提示一些可能作为药物靶向的分子以及可能具有协同性的特异性靶向方式。最后，我们计划建立IL-10R1泛素化抑制型的突变小鼠模型，以求将来在体内验证这条通路作为疾病治疗靶向的可行性

天然及适应性免疫进程中的各个层面均有各种细胞因子的参与。有关细胞因子功能调节的研究有重要基础及应用价值。白细胞介素10（IL-10）及其受体是体内起主要抑制免疫功能的细胞因子系统。可是关于IL-10信号转导的负调控机制的报道还很少。我们的研究发现，IL-10受体亚基IL-10R1可以选择性与Beta-Trcp泛素化连接酶结合。 IL-10R1与Beta-Trcp的结合依赖于受体胞内片段中的两个在哺乳动物中保守的、含有天冬氨酸-丝氨酸-甘氨酸（DSG）序列的原件；并在其中的丝氨酸残基磷酸化后结合Beta-Trcp。这样特异性的与泛素化连接酶的结合促使IL-10R1的泛素化，刺激其随后从胞膜上的内吞以至降解。这种在IL-10R1蛋白水平上的负调控机制显著影响了细胞对IL-10的响应。对上游的磷酸化事件的进一步的研究提示，激酶CK1可能参与了磷酸化DSG序列。有趣的是，在LPS刺激下，我们观察到了IL-10R1 mRNA的稳定性增加及表达上调，指出机体可能对IL-10R1水平有多元化的调控方式。最后，我们建立了野生及泛素化缺陷型IL-10R1的BAC大片段的转基因小鼠，验证了转基因的mRNA以类似与内源性丰度的表达。这些小鼠模型将被用来在验证是否IL-10R1泛素化通路可以作为潜在的治疗免疫失调疾病的靶向。