HBx蛋白调控多个S100蛋白家族成员表达的机理及功能初探

S100蛋白家族是一组分子量较小的钙结合蛋白，通过与靶蛋白互作在胞内外参于调节细胞增生与凋亡，细胞骨架与细胞基质重构及迁移等重要生物学过程。但该家族蛋白复杂的表达调控方式和胞内外信号传递途径却远未阐明。前期工作中我们首次发现乙型肝炎病毒HBV或其编码的HBx蛋白的稳定转染均能显著下调7个S100蛋白（S100A4，S100A6，S100A10，S100A11，S100A13，S100A16和S100P)的表达；但其协同下调的分子机制和生物学功能目前尚无相关报道。本项目在前期结果基础上，拟分别选取代表性蛋白重点研究以下三个方面：1）HBx调控S100蛋白的分子机制及S100蛋白在临床肝病标本中的表达情况；2）S100蛋白相互作用蛋白分析；3）S100蛋白作为胞外信号分子在调节细胞增生与凋亡，细胞迁移，以及HBV复制等过程中生物学功能的初步探索；为其进一步深入研究及临床应用研究奠定基础。

该项目自立项以来项目负责人及本课题组紧紧围绕项目的研究目标和研究内容，在科研探索、人才培养，经费使用等方面认真严格的开展了各项工作，并取得了一定的成果。首先，我们对S100A6蛋白在临床肝癌标本中的表达情况进行了免疫组化分析，发现其在原发性肝癌，特别是在肝胆管癌中呈高表达；对S100A6的RNAi沉默实验表明该基因的沉默能够显著降低细胞的迁移和增生能力；在S100A6沉默的细胞模型中进行S100A6的再表达实验，表明该蛋白能够恢复细胞的迁移及增生能力；所以我们认为S100A6是一个潜在的治疗肝癌的靶标。同时我们通过表达与纯化携带不同标签的S100A6蛋白进行胞外实验，结果表明S100A6调节细胞迁移与增生的功能主要依赖于其细胞内的功能，而不是依赖于胞外分泌与胞膜受体途径。课题组进一步的深入研究表明S100A6的表达上调与E-cadherin下调，β-catenin核转位以及PI3K/AKT通路激活紧密相关，值得进一步深入研究。其次，我们对S100A10, S100A13和S100A16的功能进行了研究，在发现S100A10能够调节细胞迁移与形变的同时，我们发现S100A13和S100A16具有相似而又不同的功能。最后，我们提出HepG2.2.15是一个研究S100家族多个成员分子功能的很好的模型。以上研究结果正在投稿中，预期在2013年上半年将有两篇高水平SCI论文见刊，而后续的深入研究有望取得更多研究成果。同时，受该课题资助的相关研究已经有4篇SCI文章发表见刊。在人才培养方面，通过该课题的实施，提高了课题负责人的研究水平和项目管理水平，提高了参与项目的研究人员及研究生的科研水平及能力。