食管鳞癌细胞中NEDD9的表达对肿瘤微环境中的髓源性抑制细胞的招募及其相互作用机制

There is an elaborated and complex cross-talk between cancer stem cells (CSCs) and tumor microenvironment (TME). CSCs and TME are like the relationship between the “bugs” and the “bed”. The bed determines the bugs fate and the bugs modify the bed. We have previously shown that NEDD9 plays an important role in regulating the stemness of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cells and is correlated with the recruitment of myeloid-derived suppressor cells (MDSC) in TME. However, there are few reports currently available regarding NEDD9 in ESCC. The interaction mechanism between ESCC cells with NEDD9 expression and MDSC from TME remains to be further explored. We hypothesize that ESCC cells with NEDD9 expression and MDSC from TME form a positive feedback loop, leading to tumorigenesis and progression. In order to prove our hypothesis, we will use ESCC cell lines and nude mice model, by means of real time PCR, western blot, lentivirus transfection, RNA interference and so on, explore the mutual influence between NEDD9 and MDSC, and confirm their interaction mechanism. This study will lay the foundation for revealing ESCC progression and provide new ideas for developing more specific therapeutic targets.

肿瘤干细胞（CSC）与肿瘤微环境（TME）在肿瘤发展过程中进行着精细而复杂的对话,CSC与TME就像是种子与土壤的关系。我们的预实验结果提示NEDD9在食管鳞癌（ESCC）干性调控中起重要作用，同时NEDD9与髓源性抑制细胞（MDSC）的招募有相关性。迄今NEDD9在ESCC的研究仍知之甚少，ESCC中NEDD9与 TME中MDSC的相互影响机制还有待进一步探讨。我们假设，ESCC中NEDD9的表达与TME中MDSC的招募有着正反馈作用。为了验证这一假说，我们将通过人ESCC细胞系KYSE70、KYSE450和裸鼠模型，采用荧光定量PCR、蛋白印迹、慢病毒载体转染、RNA干扰等手段，从分子、细胞、组织以及动物整体水平等多方面探讨NEDD9与MDSC的相互影响，明确其相互作用机制。本研究将从NEDD9和MDSC的新视点为揭示ESCC进展奠定基础，从而为开发更具有针对性的治疗靶点提供新思路。

食管癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，其发病率位居全部恶性肿瘤第9位，死亡率居第6位。肿瘤干细胞具有自我更新、多分化的能力，并认为可能是肿瘤发生、复发、高耐药性及产生异质性的主要原因。我们通过侧群分选获得食管鳞癌干细胞，基因芯片分析发现10个基因是在食管鳞癌干细胞中高表达，进一步在通过成球培养获得的食管鳞癌干细胞中进行验证，发现仅有NEDD9高表达。临床数据分析进一步发现，NEDD9的表达与食管癌患者的不良预后相关。NEDD9对于食管鳞癌细胞维持干细胞样特性起着关键作用。接下来，我们利用人多因子试剂盒筛选NEDD9稳定高表达和敲除的食管鳞癌细胞株中趋化因子的表达谱，发现CXCL8的表达差异最显著，且证明NEDD9可通过ERK通路调控CXCL8的表达。此外，CXCL8介导NEDD9诱导的髓源性抑制细胞的募集。同时，我们证明髓源性抑制细胞通过NOTCH-NEDD9途径调控食管鳞癌细胞的干性。综上，这些发现表明NEDD9促进食管鳞癌细胞的干性，通过ERK通路调控CXCL8的表达，进而招募髓源性抑制细胞到肿瘤组织中，提示NEDD9是食管鳞癌的一个潜在治疗靶点。本项目的研究成果为寻找特异性靶向食管鳞癌干细胞治疗食管鳞癌提供了一定的理论基础和数据支撑。