MicroRNA-330调控SH3GL2基因影响胶质瘤干细胞生物学行为机制的研究

miR-330是新发现的microRNAs之一，其生物学功能尚不清楚。我们首次报道了SH3GL2基因在人脑胶质瘤组织中表达降低。近期研究发现，SH3GL2基因在人脑胶质瘤肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)中表达显著降低，miR-330在胶质瘤CSCs中表达上调，且与SH3GL2基因mRNA 3′非翻译区结合，负性调节SH3GL2基因的表达，但具体作用方式和调控机制不清。本研究通过荧光素酶报告基因检测等方法，①验证miR-330通过"种子区"与SH3GL2的直接作用和关键结合位点；②在体外胶质瘤CSCs与裸鼠移植模型中，明确miR-330对SH3GL2基因表达和功能的调节作用；③深入研究miR-330是否通过SH3GL2基因介导的EGF-ERK信号转导通路调控胶质瘤CSCs的生物学行为。本项目的研究结果不仅能揭示脑胶质瘤发生发展的机制，而且能为胶质瘤治疗提供新靶点。

miR-330是新发现的microRNAs之一，其对脑胶质瘤发生发展的影响和机制尚不清楚。通过本项目研究，我们证实了miR-330在脑胶质瘤组织和胶质瘤干细胞(GSCs)中表达上调，而SH3GL2基因的表达水平则与之相反。通过荧光素酶报告基因检测方法证实miR-330通过"种子区"与SH3GL2基因mRNA 3′非翻译区结合，负性调节SH3GL2基因的表达。在胶质瘤细胞和GSCs中，过表达miR-330能显著增加上述细胞的增殖水平，诱导上述细胞的迁移和侵袭，显著增加S期和G2/M期细胞数，抑制上述细胞凋亡，显著抑制caspase-3、TRAIL的表达水平，上调XIAP和Bcl-2的表达，抑制凋亡信号转导通路。在胶质瘤和GSCs中沉默miR-330的表达则表现出与过表达miR-330相反的结果。建立miR-330和SH3GL2基因双过表达和双表达沉默的GSCs，过表达miR-330通过下调SH3GL2显著增加GSCs的增殖水平，促进GSCs的迁移和侵袭，抑制上述细胞的凋亡水平，抑制caspase-3、TRAIL的表达水平，上调XIAP和Bcl-2的表达，抑制凋亡信号转导通路。而表达沉默的miR-330通过上调SH3GL2，发挥反向的调节作用。最后建立裸鼠移植瘤模型，证实了抑制miR-330表达的同时上调SH3GL2比单因素处理组能更有效地抑制移植瘤的生长，减少肿瘤体积并延长荷瘤裸鼠的生存期。本项目的研究结果不仅揭示了新的脑胶质瘤发生发展的机制，而且为胶质瘤治疗提供了新靶点。