EB病毒LMP1促鼻咽癌机制中的miRNA分子通路

LMP1是EBV致癌的关键病毒癌基因，能促进鼻咽粘膜上皮细胞转化和肿瘤的演进。miRNA是具有转录后基因表达调控作用的小分子RNA，在恶性肿瘤中表达异常，与其发生发展密切相关且能作为诊断预后标记和治疗靶点。淋巴瘤和鼻咽癌中LMP1与某些miRNA表达相关，这些miRNA维持EBV的潜伏感染状态、调节干扰素通路相关基因表达、促进肿瘤浸润和转移；提示miRNA是LMP1促癌机制中的重要分子通路。我们研究发现LMP1阳性和阴性的鼻咽癌细胞系中miRNA表达谱存在差异；差异表达的miRNA分子与其他多种肿瘤生物学行为密切相关。本项目通过鼻咽粘膜上皮细胞导入LMP1基因、鼻咽癌细胞中RNA干扰沉默LMP1基因，观察miRNA表达谱及细胞生物学行为的改变，并对上调及下调的miRNA进行矫正的挽救试验评价其具体作用机制，阐明LMP1促癌机制中的miRNA通路，为鼻咽癌发生发展及生物靶向治疗提供线索。

潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1，LMP1)是近年研究EB病毒在鼻咽癌发生发展中作用而受到密切关注的信号传递蛋白，目前的研究发现，LMP1蛋白可通过TRAFs/TRADD、Ras-Raf-MER-ErK1/2以及JAK-STAT等信号传递系统调节和控制细胞的增殖和凋亡，转化上皮细胞，在癌症的发生、发展过程中起重要作用。本研究通过在鼻咽癌细胞建立过表达LMP1基因模型，发现LMP1过表达可明显抑制鼻咽癌细胞的转移及增殖能力，并将鼻咽癌细胞阻滞在G0/G1期。进一步的研究结果显示，LMP1过表达后明显可下调鼻咽癌细胞Rho家族成员Rac1的表达水平，同时下调p-Akt（Thr308）水平，但对Akt的表达无显著影响。通过蛋白质谱分析，研究发现LMP1基因在鼻咽癌细胞过表达后，下调USP22(Ubiquitin-specific protease 22)蛋白与BHMT(Betaine homocysteine methyltransferase)蛋白的表达水平。课题的深入研究证实，USP22与肝癌患者的临床预后呈明显的负相关，其表达水平与Survivin蛋白的具有密切的相关性；通过RNA干扰，将肝癌细胞内的USP22表达水平下调后，肝癌细胞的增殖受到明显的抑制；临床多中心的免疫组化实验结果，BHMT在肝癌中的表达明显高于癌旁，BHMT在肝癌中表达升高提示肝癌患者的预后不良。