基于多维液质联用和微生物转化的中药体内外香豆素类成分群表征及其在中药质量控制中的应用研究

中药质量控制是一系统工程，建立效应物质基础上的中药质量控制模式是其最终目标，明确中药自身及进入体内的化学成分及其代谢物才有可能实现这一目标。然而现阶段体现中药化学成分整体特征的指纹图谱未对指纹峰鉴定，未充分表征其丰富的化学信息内涵。中药自身及其进入体内后的复杂性，使得体内化学成分及其变化更难以阐述。本课题即针对中药体内外化学成分不明确这一难题，遵循"由点及面，发掘完善"的原则，选择富含香豆素类成分的3种常用中药北沙参、秦皮和前胡为研究对象，以多维液质联用技术为研究手段，以香豆素类成分的质谱裂解特征为基础，辅以单一香豆素成分的微生物转化和体内代谢物鉴定，探索基于多维液质联用和微生物转化的复杂体系中中药成分分析的可行模式，研究中药体内外化学成分群的定性和定量表征，分析各成分及其代谢物的体内变化，阐述效应物质基础，为质量控制指标的选择提供依据，为质量控制系统工程中各学科的连接搭建物质桥梁。

中药质量控制是一系统工程，建立效应物质基础上的中药质量控制模式是其最终目标，明确中药自身及进入体内的化学成分及其代谢物才有可能实现这一目标。本课题针对中药体内外化学成分不明确以及难以鉴定的难题，选择富含香豆素类成分的3种常用中药北沙参、秦皮和前胡为研究载体，采用HPLC-QTrap, UPLC-TripleTof等多种液质联用技术，对香豆素类成分进行了系统分析。已正式发表论文8篇，SCI收录8篇，待发表7篇；编写论著2部；培养硕士研究生10名，已毕业7名。主要研究内容和成果如下：.1）系统总结了北沙参中呋喃香豆素及其同分异构体、秦皮中简单香豆素、前胡中吡喃香豆素的质谱裂解规律，创新性建立相对丰度比法区分呋喃香豆素同分异构体，并鉴定了秦皮中35个化学成分、前胡中24个香豆素成分；2）采用正负离子切换模式HPLC-MS/MS法，分别联合响应曲面法优化提取条件和质谱库检索技术，同时测定了秦皮中11种化学成分，前胡中14种香豆素成分，并对正品和伪品进行了有效区分；3）在微生物转化和肝微粒温孵法体外代谢研究的基础上，对3种香豆素单体大鼠体内代谢进行了研究，鉴定出欧前胡素、异欧前胡素和蛇床夫内酯代谢物各51个、19个和 4个，并研究了体内外代谢相关性；同时对欧前胡素和异欧前胡素在大鼠体内的吸收和排泄动力学进行了研究；4）对药材整体在大鼠体内的代谢产物进行了鉴定，分别鉴定出北沙参99种、秦皮56种及前胡36种代谢产物；5）建立了生物样品中23种香豆素的定量测定方法，分别对3种药材在大鼠体内的吸收和排泄动力学进行了研究。6）初步建立了香豆素类成分的质谱库，可利用库检索技术对香豆素成分进行识别和鉴定。 .本课题对中药及生物体复杂体系中化学成分群表征方法进行了有益探索，其研究结果为普适性的中药质量控制方法学体系的初步建立奠定了坚实的基础，为效应物质基础上中药质量控制模式的建立提供了科学依据。