半夏厚朴汤抗抑郁作用机制的代谢组学研究

Banxia Houpu decoction,a classical Chinese herbal compound for depression which consist of Banxia(Pinellia ternata Thunb.) ,Houpu (cortex magnoliae officinalis) ,Fuling (poria), Shengjiang (ginger) and Suye(perilla leaf).On the basis of establishing the consecutive, on-time and dynamic NMR methodology, we planed to study on the mechanism of antidepressant-like effects of Banxia Houpu Decoctionin in whole, by detecting the small molecular metabolite in the animal body fluid applying the NMR metabonomics method. By observing the similarities and differences of the NMR spectrum after the animals administrated the Banxia Houpu Decoctionin, examining the changes of the small molecular metabolites in vivo, we could confirm the "group spectrum of biological markers", aiming to discover the process of antidepressant-like effects of Banxia Houpu Decoctionin，using the pattern recognition to classify the biological markers group related with the antidepressant, therefore, we could analysis and presume the potential mechanism of antidepressant-like effects of Banxia Houpou Decoctionin. This metabonomics based on the NMR methodology is claimed to bring a fresh and new concept into the area of understanding and explaining the mechanism of antidepressant-like effects of Banxia Houpu Decoctionin.

半夏厚朴汤具有行气散结, 降逆化痰之功效,是治疗痰气郁结型郁证的经典名方, 由半夏、厚朴、茯苓、生姜、苏叶等五味中药组成。本项目拟在建立连续、实时、动态测定动物体液中小分子代谢物变化的NMR方法的基础上，应用基于核磁共振（NMR）的代谢组学方法，从整体（中药作用于整体动物）意义上研究半夏厚朴汤的抗抑郁作用机制。通过观察半夏厚朴汤作用于抗抑郁模型动物后，NMR谱图的变化，考察动物体内小分子代谢物的变化，确定与抗抑郁相关的组合"生物标记物群谱"，同时进行模式识别，对与抗抑郁相关的生物标记物群进行归类，以期发现半夏厚朴汤抗抑郁的发生、发展的代谢过程，从而分析推测其可能的抗抑郁的代谢作用机制。NMR代谢组学将为理解并阐释半夏厚朴汤的抗抑郁作用机制提供一个全新的视角，并为中药的作用机制研究提供一种高新技术手段。

半夏厚朴汤具有行气散结, 降逆化痰之功效,是治疗痰气郁结型郁证的经典名方, 由半夏、厚朴、茯苓、生姜、苏叶等五味中药组成。本项目在建立连续、实时、动态测定动物体液中小分子代谢物变化的液质联用(LC-MS)及核磁共振(NMR)方法的基础上，应用基于LC-MS和NMR的代谢组学方法，从整体（中药作用于整体动物）意义上研究了半夏厚朴汤的抗抑郁作用机制。.本研究以大鼠慢性束缚应激刺激为模型模拟大鼠的抑郁症。采用1H-NMR 和HPLC-MS/MS联合的代谢组学分析技术，结合多元统计分析方法，寻找出适于解释抑郁症的潜在生物标记物。对不同剂量的半夏厚朴汤给予CRS大鼠后的代谢特征进行了分类比较，鉴定分析了半夏厚朴汤对抑郁症干预的差异表达代谢物。与此同时，建立了半夏厚朴汤治疗抑郁症的代谢网络及NMR与LC-MS代谢组学药物治疗疗效的评价模型。在上述研究基础上，将半夏厚朴汤进行全方拆方分析，探究了半夏厚朴汤的君、臣药之间的配伍规律及其抗抑郁作用。.试验表明半夏厚朴汤有明显的抗抑郁作用。经1H-NMR 和HPLC-MS/MS检测，可得到24个与抑郁症有关的内源性代谢物。将这些代谢物进行代谢网络构建后发现有5条代谢通路与抑郁症显著相关，包括氨基酸途径、能量代谢途径、肠微生物代谢途径、尿素循环（精氨酸及脯氨酸代谢）、其他途径（胆碱及溶血磷脂酰胆碱和尿酸及甜菜碱）。其中，色氨酸、乳酸、乙酸、硬脂酸、柠檬酸、琥珀酸、2-酮戊二酸、尿酸、肌酸、磷酸肌酸、肌酸酐等水平下降，犬尿喹啉酸、马尿酸、苯丙氨酸、尿素等水平上升，可作为半夏厚朴汤抗抑郁作用的潜在生物标记物。本研究通过比较不同剂量组半夏厚朴汤给药前后CRS抑郁大鼠的结果显示，中、高剂量半夏厚朴汤能较好的逆转抑郁大鼠的绝望行为和情绪状态，而低剂量半夏厚朴汤几乎无作用或作用较弱。分析其代谢水平，结果显示中、高剂量给药组和CRS组大鼠有较明显的区分，进一步印证了半夏厚朴汤的抗抑郁作用。.NMR和LC-MS代谢组学为理解并阐释半夏厚朴汤的抗抑郁作用机制提供了一个全新的视角，并为中药的作用机制研究提供了一种高新技术手段。