受体相互作用蛋白1及相关信号分子在光损伤人皮肤成纤维细胞中作用机制的研究

受体相互作用蛋白(RIP)是一种重要的细胞信号转导分子，最近，国际上3个独立研究均发现RIP是细胞生存和死亡的重要交叉点，其中RIP1是RIP家族中重要的蛋白。我们前期蛋白质组学的研究首次发现紫外线照射人皮肤成纤维细胞后细胞内RIP1明显升高，并用Western Blot的方法证实这一结果，其在紫外线引起皮肤光损伤中的作用机制研究尚无报道。本项目拟在前期发现的基础上，深入探讨RIP1在长波和中波紫外线照射人皮肤成纤维细胞中的作用及其作用机制。具体研究内容：1）用RNA干扰的方法建立RIP1基因沉默的原代人皮肤成纤维细胞；2）研究RIP1在紫外线照射人皮肤成纤维细胞引起凋亡、产生活性氧簇和基质金属蛋白酶中的作用，以揭示RIP1在皮肤急性光损伤和光老化中的作用；3）研究RIP1在紫外线照射皮肤成纤维细胞中作用的信号转导途径。本项目是申请者前期创新性工作的延伸和扩展，有望进一步取得原创性成果。

受体相互作用蛋白(RIP)是一种重要的细胞信号转导分子。 最近， 国际上 3 个独立研究均发现 RIP 是细胞生存和死亡的重要交叉点，在细胞的凋亡与存活、细胞的.程序性坏死等过程中发挥着关键性的作用。其中，RIP1 是 RIP 家族中的重要蛋白。本课题组在前期工作中通过双向电泳结合质谱鉴定技术首次发现小剂量中波紫外.线照射人皮肤成纤维细胞后， 细胞内 RIP1 的表达明显升高， 并用 RT -PCR 和 WesternBlot 的方法证实了这一结果，但 RIP1 在中波紫外线照射成纤维细胞中的作用研究目前尚无报道。本课题经过三年的研究已基本完成预期目标：1）用RNA干扰的方法建立RIP1基因沉默的NIH3T3皮肤成纤维细胞；2）研究RIP1在紫外线照射NIH3T3细胞引起凋亡、产生活性氧簇和基质金属蛋白酶中的作用，以揭示RIP1在皮肤急性光损伤和光老化中的作用；3）研究RIP1在紫外线照射皮肤成纤维细胞中作用的信号转导途径。结果：1）成功建立了 RIP1 干扰的 NIH3T3 成纤维细胞，且干扰持续时间超过 96h。2） UV 照射经 RIP1 干扰的 NIH3T3 细胞 24h 后， 细胞内 MMP-1、 MMP-3 mRNA 的表达水平明显升高，24h 后 MMP-1 蛋白水平的表达也明显升高。3）UVB 照射经 RIP1 干扰的 NIH3T3 细胞 24h 后，细胞出现凋亡形态，细胞凋亡率升高，且 Caspase-8 及-3 的活性均明显升高。4）UVB 照射经 RIP1 干扰的 NIH3T3 细胞 12h 后，细胞内活性氧的活性明显下降。.已发表SCI收录论著一篇：Yan Y, Li L, Xu HX, Peng SG, Qu T, Wang BX.Receptor interacting protein 1 involved in ultraviolet B induced NIH3T3 cell apoptosis through expression of matrix metalloproteinases and reactive oxygen species production.Chin Med J (Engl). 2013 Nov;126(22):4327-4333.