HO-1介导自噬参与保护高糖诱导的足细胞损伤的机制研究

近来凋亡作为足细胞死亡的机制已深入研究，而对自噬的研究则刚刚起步。特别是糖尿病肾病，足细胞损伤是糖尿病肾病进展的触发器，而自噬在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用尚不清楚。本项目利用体外高糖培养的足细胞和体内饲养db/db糖尿病小鼠模型和在前期研究的基础上进一步探索：⑴从形态、生化指标深入的研究不同浓度和不同时间状态下高糖对足细胞自噬的影响；⑵高糖状态下，足细胞自噬的改变与足细胞凋亡的相关性；⑶HO-1 基因表达抑制和过表达对体外高糖培养的足细胞损伤及自噬产生的影响，明确HO-1诱导足细胞自噬，降低足细胞损伤后从体内用HO-1特异性抑制剂znPP处理db/db糖尿病小鼠，探讨足细胞自噬和损伤影响；通过上述研究我们将阐明自噬在DN中足细胞损伤中的保护效益及HO-1靶向性基因治疗对足细胞的保护作用，这不仅为DN足细胞损伤发病机制的研究提供新的视点，同时对DN新药的研制和开发也具有重要的指导意义。

糖尿病肾病的特征是早期微量白蛋白发生，随着时间推移，进展蛋白尿，这是慢性肾病导致终末期肾脏病常见原因。足细胞数量减少、密度减低、残留的足细胞代偿性肥大、足突增宽、融合。这些改变是导致糖尿病肾病患者蛋白尿形成的重要原因。因此，如何更好地了解DN的发病机制及其病理生理变化，从而更好地防治DN，就成为了一个亟待解决的问题。足细胞数量减少、凋亡是导致糖尿病肾病患者蛋白尿形成的启动因素。探讨足细胞凋亡的机制对于降低蛋白尿，延缓糖尿病肾病的发展具有重要作用。本项目利用体外高糖培养的足细胞和体内饲养db/db糖尿病小鼠模型和在前期研究的基础上探索如下内容：（1）高糖是否诱导足细胞自噬的变化；（2）自噬的变化在高糖诱导足细胞损伤中的作用；（3）HO-1 基因过表达和抑制对高糖诱导的肾小球足细胞自噬影响；(4)从体内观察 HO-1 特异性抑制剂znPP 对高糖状态下足细胞自噬的影响及足细胞损伤作用。通过对以上四个方面的内容进行研究和探索；我们获得一些重要结果：主要进展结果如下：⑴从形态、生化指标深入的研究不同浓度和不同时间状态下高糖对足细胞自噬的影响，表明，高糖环境下，早期足细胞自噬是增加的，随着时间的延长，足细胞自噬数目降低；⑵高糖状态下，足细胞自噬的增加具有降低足细胞凋亡，起到保护足细胞作用；⑶HO-1 基因表达抑制和过表达对体外高糖培养的足细胞损伤及自噬产生的影响，明确HO-1诱导足细胞自噬，降低足细胞损伤；（4）并体内用HO-1特异性抑制剂znPP处理db/db糖尿病小鼠，明确了足细胞自噬和损伤影响，并进一步从动物证明了HO-1表达降低加速糖尿病小鼠肾脏的进展，蛋白尿增加；通过上述研究我们将阐明自噬在DN中足细胞损伤中的保护效益及HO-1靶向性基因治疗对足细胞的保护作用，这不仅为DN足细胞损伤发病机制的研究提供新的视点，同时对DN新药的研制和开发也具有重要的指导意义。