乳酸杆菌微生态制剂表达仔猪冠状病毒性腹泻病毒保护性抗原基因研究

乳酸杆菌作为微生态制剂中的主要益生菌广泛应用于食品、饲料加工业。构建乳酸杆菌质粒载体，表达在黏膜系统中增殖的病原微生物的保护性抗原基因，制备绿色环保型多功能黏膜免疫的微生态制剂疫苗应用前景广阔。猪传染性胃肠炎和流行性腹泻冠状病毒是仔猪腹泻的主要病原，黏膜免疫是为该病提供免疫保护的主要途径，研制刺激肠道黏膜免疫系统的基因工程乳酸杆菌疫苗有重要意义。本项目拟在从微生态制剂或健康猪体内分离、鉴定、筛选出生产性能良好的乳酸杆菌的基础上，制备thyA基因缺陷型乳酸杆菌，构建含有TGEV和/或PEDV主要保护性抗原基因的以thyA基因为选择压力的非抗性乳酸杆菌表达载体pW425t，转化乳酸杆菌，检测表达产物，并与微生态制剂混合口服接种仔猪，测定粪便SIgA、胃肠黏膜相关淋巴组织中T、B细胞变化和仔猪的生产性能以及攻毒保护试验，探讨基因工程乳酸杆菌微生态制剂作为仔猪冠状病毒性腹泻黏膜免疫的可行性。