源于东乡野生稻耐开花期低温冷害相关基因的分离与克隆

针对水稻耐开花期低温冷害育种的急迫性，以及耐开花期低温冷害相关基因基础研究的缺乏，以本项目组已育成的一对近等基因导入系IR64（开花期对低温冷害敏感）和BF64（开花期耐冷基因来源于东乡野生稻）为材料，在水稻开花期同时进行低温和适温2种处理。取2处理条件下开放的颖花，分别提取总RNA和蛋白质，进行mRNA差异显示和比较蛋白组学分析。分析开花期耐低温冷害相关基因在转录水平和翻译水平两个层次上表达产物的相互关系，探明决定开花期与耐冷性有关的关键基因序列，采用RT-PCR和RACE技术克隆基因全长序列，并采用Southern杂交、荧光定量PCR和Werstern蛋白质印迹检测对目的基因进行功能验证。不仅为我国水稻育种提供具有自主知识产权的基因，对减轻水稻冷害损失具有重大意义，而且为加快东乡野生稻这一特异种质资源中有利基因的发掘、克隆及利用提供技术平台。