长链非编码RNA Lnc-RP11-159G9.5.1-2调控纤维帽平滑肌细胞功能在颈动脉狭窄斑块稳定性中的作用及机制研究

Plaque stability is a risk factor for carotid artery stenosis which predisposes to cerebral vascular events. The integrity of the fibrous cap is thought to be one of a key factor affecting the stability of the plaque. Vascular smooth muscle cell as the main cell of fibrous cap plays main role in maintaining plaque stability. Our previous study has revealed the significant up-regulated expression of Lnc-RP11-159G9.5.1-2 in unstable plaque.The regulatory role of Lnc-RP11-159G9.5.1-2 which might involved apoptosis, contraction and so on. This research is designed as follows: Firstly, through research on clinical information and samples to explore the relationship between Lnc-RP11-159G9.5.1-2 and plaque stability. Secondly, in vitro study on vascular smooth muscle cells, we will investigate the molecular mechanisms and signal pathway of Lnc-RP11-159G9.5.1-2 in regulating plaque stability. Thirdly, in vivo study, through building the carotid artery stenosis model with Lnc-RP11-159G9.5.1-2 local intervention, we will clarify the effect of Lnc-RP11-159G9.5.1-2 on pathological changes and biomechanical properties of fibrous cap in carotid artery plaques. The project may provide new therapeutic targets for carotid stenosis, and provide new ideas of carotid plaque stability for the early noninvasive diagnosis, condition monitoring and prognosis evaluation.

斑块稳定性是颈动脉狭窄引起脑血管事件的危险因素。纤维帽的完整性是维持斑块稳定性的关键因素之一，平滑肌细胞作为纤维帽的主要组成成分在维持斑块稳定性中发挥了重要作用。本中心发现不稳定斑块中Lnc-RP11-159G9.5.1-2表达显著上调，预实验结果表明Lnc-RP11-159G9.5.1-2可能通过调控细胞凋亡、收缩等功能影响斑块的稳定性。本项目拟从1.临床信息与样本分析探究Lnc-RP11-159G9.5.1-2与斑块稳定性的相关性；2.在血管平滑肌细胞上研究Lnc-RP11-159G9.5.1-2调控斑块稳定性的分子机制及作用通路。3.构建小鼠颈动脉狭窄模型并局部干预Lnc-RP11-159G9.5.1-2，明确Lnc-RP11-159G9.5.1-2对颈动脉斑块纤维帽病理与生物力学的作用。本项目为颈动脉狭窄提供新的治疗靶点并为斑块稳定性的无创诊断、监控以及预后提供新的思路。

斑块稳定性是颈动脉狭窄引起脑血管事件的危险因素。纤维帽的完整性是维持斑块稳定性的关键，平滑肌细胞作为纤维帽的主要组成成分在维持斑块稳定性中发挥了重要作用。本中心发现不稳定斑块中Lnc-RP11-159G9.5.1-2表达显著上调，生物信息学分析Lnc-RP11-159G9.5.1-2可能通过调控细胞生长周期、收缩、分泌等功能影响斑块的稳定性。本课题研究通过临床组织样本及体外细胞研究首次对Lnc-RP11-159G9.5.1-2、其共表达凋亡通路相关mRNA APAF1及下游合成的凋亡直接相关蛋白——APAF1蛋白间的具体调控机制进行了探索。明确Lnc-RP11-159G9.5.1-2与其共表达凋亡通路相关 mRNA 的协同上调关系 ，并在细胞内定位两者的表达位置关系 。提示Lnc-RP11-159G9.5.1-2在平滑肌胞浆内通过与凋亡通路相关mRNA APAF1A直接结合的方式，下游合成更多凋亡直接相关蛋白——APAF1蛋白，致平滑肌细胞凋亡上调，进而使斑块纤维帽倾向于破裂，颈动脉斑块组织趋于不稳定，影响了颈动脉粥样硬化 疾病的发展进程和最终预后。构建小鼠颈动脉粥样硬化模型并进行尾静脉注射构建的AAV病毒对小鼠体内Lnc-RP11-159G9.5.1-2表达进行干预，明确Lnc-RP11-159G9.5.1-2表达增多导致颈动脉斑块纤维帽病中平滑肌凋亡上调的具体作用机制。本研究认为Lnc-RP11-159G9.5.1-2及共表达凋亡通路相关 mRNA APAF1可能成为未来颈动脉粥样硬化诊断及治疗新靶点，将为临床诊治颈动 脉粥样硬化提供新思路、新策略。