钠通道Nav1.8在玫瑰痤疮炎症发生中的作用及机制研究

Rosacea is a chronic inflammatory skin disease that greatly affects a person’s quality of life. Nav1.8 nociceptors, by interacting with dendritic cells (DCs), regulate the IL-23/IL-17 pathway and control cutaneous immune responses. Our previous results showed that Nav1.8 expression levels are evidently upregulated in rosacea. Based on this discovery, we speculate that Nav1.8 channel may involve in the skin inflammation in rosacea. In this study, we will study the role of Nav1.8 on the progression of rosacea by employing both Nav1.8 siRNA and selective Nav1.8 sodium channel blocker. Next, we will study the molecular mechanism of Nav1.8 on skin inflammation and the regulatory mechanism of CCL2 on Nav1.8 expression and activation in rosacea by employing DCs deficient mices as well as molecular biology methods, reveal the potential role of Nav1.8 as novel therapeutic targets in the treatment of rosacea. In conclusion, our study not only contributes to revealing the molecular mechanism through which Nav1.8 involves in rosacea progression, but also provides important cues for the rosacea treatment.

玫瑰痤疮是一种主要发生于面部且易反复发作的炎症性皮肤疾病，对患者的身心健康和生活质量都有极大影响。Nav1.8是一种炎症相关的离子通道蛋白，能够通过调控树突细胞（DCs），参与皮肤炎症的发生。我们通过预实验发现：Nav1.8在玫瑰痤疮组织中表达明显上升，推测Nav1.8可能参与了玫瑰痤疮炎症的发生。本课题将在前期研究基础上，利用Nav1.8 siRNA或Nav1.8选择性抑制剂抑制小鼠皮肤中Nav1.8的表达和功能，明确Nav1.8对玫瑰痤疮发生的作用；随后利用DCs清除小鼠，深入揭示Nav1.8通过调控DCs参与玫瑰痤疮炎症发生的分子机制及导致Nav1.8过表达的上游调控机制，并探讨Nav1.8作为新靶点在玫瑰痤疮治疗中的潜在作用。本研究将有助于揭示Nav1.8在玫瑰痤疮炎症发生中的作用及机制，为玫瑰痤疮的临床治疗提供新的思路与理论依据。

研究背景：玫瑰痤疮是一种好发于面部的慢性炎症性皮肤病，其发病机制与免疫功能异常相关。角质形成细胞是皮肤免疫屏障中的重要组成部分，该细胞通过分泌炎性细胞因子参与了多种炎症性皮肤病的免疫调控，但角质形成细胞在玫瑰痤疮免疫紊乱中的作用及机制尚不明确。本研究旨在探索角质形成细胞炎性细胞因子释放导致玫瑰痤疮免疫失衡的具体机制，为玫瑰痤疮的临床治疗提供新的思路与理论依据。.研究内容及重要结果：首先，我们研究发现离子通道蛋白Nav1.8在玫瑰痤疮患者皮损表达明显上升，在LL37诱导的玫瑰痤疮样小鼠炎症模型中也表达上升。通过皮内注射siRNA敲降皮肤中的Nav1.8能明显缓解小鼠中玫瑰痤疮表型并减少皮损组织中的免疫细胞的浸润。但我们进一步利用RTX处理（感觉神经消融）抑制小鼠感觉神经或用Nav1.8cre（Nav1.8离子通道功能缺失）抑制Nav1.8的离子通道活性并不影响LL37诱导的玫瑰痤疮的形成。因此，我们推测角质细胞中的Nav1.8以非离子通道的功能在玫瑰痤疮中发挥作用。随后，我们扩增了Nav1.8的两个重要胞内区域（N末端1-125和C末端1723-1956）,并利用IP结合质谱鉴定技术分析了与Nav1.8相互作用的蛋白。同时，我们利用RNA-seq技术获得了Nav1.8敲降小鼠玫瑰痤疮样皮损的转录组表达谱，进一步分析Nav1.8及其相互作用的蛋白可能调控的下游信号通路。我们通过coIP技术、免疫荧光技术、荧光共聚焦等技术验证了Nav1.8能靶向结合SOD2，并能通过影响SOD2的线粒体转运从而影响细胞内ROS的累积，从而导致炎性细胞因子的分泌及随后的皮损组织中免疫细胞的募集。.科学意义：整个研究证明Nav1.8通过靶向结合SOD2介导角质形成细胞炎性细胞因子释放及玫瑰痤疮免疫失衡的具体机制，为玫瑰痤疮的临床治疗提供新的思路与理论依据。