兼有肿瘤主动靶向和高效入胞特性的超酸敏纳米胶束释药体系的构建

本课题旨在构建一种兼有配体主动靶向及穿膜肽介导高效入胞特性的复合药物运载体系。将配体LHRH、穿膜肽TAT依次设计在pH响应胶束体系中，利用正常组织与肿瘤组织pH值差异，调控配体与穿膜肽在释药体系中的存在状态，实现载体在靶位特异性累积和将药物高效转运至肿瘤细胞内的双重功能。以聚乳酸和聚组氨酸为疏水组分，PEG为亲水组分，制备2组嵌段聚合物，测定聚合物结构，分别连接LHRH及靶向物质TAT，制备混合酸敏胶束。芘荧光探针光谱法研究两亲性聚合物在水溶液中的胶束化行为，电镜测定胶束粒径与形态，光物理法研究混合胶束配比、释药与pH值响应之间的关系，激光共聚焦荧光显微技术检测胶束与肿瘤细胞间的相互作用，体内外药效学研究胶束对肿瘤pH值的特异响应性及释药规律，验证其主动靶向、高效入胞释药的抗肿瘤效果。这种可对实体肿瘤环境做出响应的多功能胶束，可为构建高效低毒的肿瘤靶向给药系统提供新策略。

本课题旨在构建一种兼有配体主动靶向及穿膜肽介导高效入胞特性的复合药物运载体系。正常组织与肿瘤组织pH值差异被用来实现载体在靶位的特异性累积与细胞内高效转运的双重功能。设计并制备了具有pH响应特性的单胶束/混合胶束体系: LHRH-PEG-PHIS /TAT-DOX、LHRH-PEG-PHIS-DOX/TAT-DOX、DSPE-PEG2000/DSPE-PEG3400-2C5/PHIS-PEG2000、FA-MP-DOX/DOX+PDTC、FA-CS/DOX+PDTC。完成了胶束理化性质的测定，包括临界胶束浓度（CMC）、胶束粒径、表面电荷及胶束稳定性等。动态透析法测定了5种胶束体系体外酸敏释药特性，分析了酸敏基团聚合度、混合胶束配比对pH值响应范围、灵敏度及释药的影响。结果表明本课题设计的5种胶束具有敏锐酸敏释药特性，在细胞内涵体pH5酸性环境下，2h释药率可达70-95%，远远高于pH7.4生理环境下的释药。以（耐药）A2780人卵巢癌细胞细胞及4T1小鼠乳腺癌细胞为模型，MTT及激光共聚焦荧光检测胶束入胞释药情况，结果表明胶束的酸敏响应特性可使配体、穿膜肽依次发挥作用，实现载体在靶位特异性累积和将药物高效转运至肿瘤细胞内的双重功能。