卵形鲳鲹SIGIRR通过TLRs-MyD88信号通路对巨噬细胞炎症应答的影响与机制研究

Single immunoglobulin interleukin-1R- related molecule (SIGIRR), a novel member of Toll-Interleukin-1 receptor family, involves in negative regulation of inflammation caused by Toll-like receptors signaling and plays important roles in immune regulation. So far, the research on the SIGIRR and their effects on macrophage and regulative mechanism are limited in fish species. This project selects Trachinotus ovatus, an economically important marine culture fish species in southern China, as research material and analyzes the SIGIRR expression pattern in tissues, investigates the effects of SIGIRR on inflammation and its regulation mechanism. The results will elucidate the anti-inflammation and regulative mechanisms of SIGIRR in macrophage and provide new insights into controlling and preventing fish diseases.

SIGIRR是新近发现的TIR家族新成员，其通过负调控TLRs信号通路引起的炎症作用而在机体免疫调节中发挥重要作用。目前，有关鱼类SIGIRR对巨噬细胞炎症反应的效应及调控机制尚未见有关报道。本项目选择我国特别是我国南方地区重要的海水养殖品种鲈形目鱼类卵形鲳鲹（Trachinotus ovatus）为研究对象，从组织水平、细胞水平、分子水平研究SIGIRR的表达模式、对巨噬细胞炎症应答的影响, 以及SIGIRR调控炎症应答的作用机制。该项目的研究成果将阐明卵形鲳鲹SIGIRR在巨噬细胞中抗炎症作用及调节机制，为鱼类病害免疫防治提供理论和策略。

SIGIRR（Single Ig IL-1R related molecule）是Toll/IL-1R超家族的重要成员，可以与TLRs竞争性结合接头分子，抑制TLRs诱导的炎症反应的过度激活，在调节先天免疫和自身性疾病中起关键作用。卵形鲳鲹（Trachinotus ovatus）SIGIRR含有两个Ig结构域，命名为双免疫球蛋白白介素1受体相关分子（Double Ig IL-1R related molecule，DIGIRR）。本研究获得了卵形鲳鲹（Trachinotus ovatus）TroDIGIRR、TroTRAF6、TroIRAK1、TroIL-1β、TroIL-6、TroIL-8和TroTNF-α序列，分析它们在正常组织和免疫刺激后组织中表达的关联性，结果表明这些分子参与卵形鲳鲹先天免疫反应。完成相关分子的单克隆抗体或多克隆抗体制备，为研究这些分子的功能奠定坚实的基础。co-IP分析显示TroDIGIRR与TroMyD88和TRAF6相互作用，不与TroTRIF互作。在卵形鲳鲹原代巨噬细胞中过表达TroDIGIRR，结果显示，TroMyD88、TroTRAF6、TroTNF-α、TroIL-1β、TroIL-8和TroIL-6的表达量下降。以上结果表明DIGIRR通过TLR-MyD88信号通路负调控炎症应答。这有助于了解卵形鲳鲹在病原刺激下调节炎症反应中信号通路，为机体产生过度炎症反应的防治提供新策略和药物靶点。